入侵害蟲(chóng)紅棕象甲核轉(zhuǎn)錄因子RfRelish編碼基因的克隆與表達(dá)特征分析.pdf

1、紅棕象甲R(shí)hynchophorus ferrugineus Olivier是我國(guó)的一種高風(fēng)險(xiǎn)性外來(lái)有害生物，是棕櫚植物的一種世界性毀滅害蟲(chóng)。該害蟲(chóng)危害隱蔽，田間種群已產(chǎn)生抗藥性而且生物防治的控制效率一直較低。因此，尋找針對(duì)該害蟲(chóng)新的、有效的可持續(xù)控制策略迫在眉睫。昆蟲(chóng)免疫是昆蟲(chóng)對(duì)抗病原天敵的最主要途徑，然而對(duì)于該害蟲(chóng)的免疫防御機(jī)理知之甚少。因此，本文通過(guò)紅棕象甲核轉(zhuǎn)錄因子RfRelish的克隆和定量表達(dá)分析等手段解析其潛在的免疫功能角色

2、。研究發(fā)現(xiàn)，該核轉(zhuǎn)錄因子RfRelish基因的全長(zhǎng)cDNA序列為2707 bp，開(kāi)放閱讀框?yàn)?148 bp。其中，5’非編碼區(qū)為87 bp，3’非編碼區(qū)為472 bp，包含AAAAAAA加尾信號(hào)并含有長(zhǎng)為12bp的poly(A)尾。該基因編碼一個(gè)由714個(gè)氨基酸組成的蛋白質(zhì)。該蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)為5.46，其分子量為81.5K Da。該編碼蛋白具有N末端的Rel homology domain(RHD)、IPT domain（Ig-like

3、, plexins, transcription factors）和由四個(gè)ankyrin repeats組成的IκB-like domain等三個(gè)NF-κB家族蛋白所具有的典型保守結(jié)構(gòu)域。同時(shí)，該蛋白具有核轉(zhuǎn)位定位信號(hào)，該信號(hào)由第210-213位氨基酸殘基KRPR組成。這些保守結(jié)構(gòu)域的存在說(shuō)明紅棕象甲R(shí)fRelish基因編碼的蛋白質(zhì)是一類(lèi)具有重要功能的轉(zhuǎn)錄因子。熒光定量分析發(fā)現(xiàn)，該基因在紅棕象甲不同組織中的表達(dá)量存在極顯著差異；其中，在