黃連素對(duì)DSS誘導(dǎo)的APCmin-+小鼠結(jié)腸腫瘤的抑制作用研究.pdf

1、廈門(mén)大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下，獨(dú)立完成的研究成果。本人在論文寫(xiě)作中參考其他個(gè)人或集體己經(jīng)發(fā)表的研究成果，均在文中以適當(dāng)方式明確標(biāo)明，并符合法律規(guī)范和《廈門(mén)大學(xué)研究生學(xué)術(shù)活動(dòng)規(guī)范(試行)》。另外，該學(xué)位論文為(蝴席魄妒由泳甄)課題(組)的研究成果，獲得(胡承。)課題(組)經(jīng)費(fèi)或?qū)嶒?yàn)室的資助，在(洙基)實(shí)驗(yàn)室完成。(請(qǐng)?jiān)谝陨侠ㄌ?hào)內(nèi)填寫(xiě)課題或課題組負(fù)責(zé)人或?qū)嶒?yàn)室名稱(chēng)，未有此項(xiàng)聲明內(nèi)容的，可以不作特別聲明。)聲

2、明人(簽名)：彭驪w1)年6月0日摘要結(jié)腸癌作為一種常見(jiàn)的消化道惡性腫瘤，其發(fā)病率在持續(xù)上升，已經(jīng)成為了一種嚴(yán)重影響我國(guó)人民生命健康的疾病。腸癌的發(fā)生是一個(gè)多因素、多步驟進(jìn)行性發(fā)展的過(guò)程。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)炎癥性腸病(Inflammatoryboweldisease，IBD)加重了患結(jié)腸癌的風(fēng)險(xiǎn)，越來(lái)越受到基礎(chǔ)與臨床研究的關(guān)注。黃連素(Berbefine)，又稱(chēng)鹽酸小檗堿，是從毛莨科黃連的植物根狀莖中提取出的一種季胺類(lèi)異喹啉生物堿，是一種傳

3、統(tǒng)的中醫(yī)消炎及抗菌藥物。大量研究表明，黃連素對(duì)結(jié)腸癌、肝癌、肺痛等多種腫瘤細(xì)胞具有抑制作用，然而黃連素對(duì)其他一些疾病，如炎癥性腸病(ⅢD)和炎癥相關(guān)的結(jié)腸癌的作用機(jī)制尚缺乏研究。本課題以能自發(fā)形成腸息肉的APC。斛小鼠為研究對(duì)象，經(jīng)DSS誘導(dǎo)炎癥促進(jìn)其結(jié)腸息肉發(fā)生、發(fā)展為腸炎相關(guān)腸癌模型，研究黃連素對(duì)DSS誘導(dǎo)的APCram／小鼠結(jié)腸炎癥性息肉的抑制作用，并探討其可能的作用機(jī)制。我們采用給四周齡的APC““什小鼠飲用含2％DSS水一周，

4、然后給予正常飲用水四周，誘導(dǎo)的結(jié)腸炎癥性息肉作為DSS模型組；以四周齡APC“訓(xùn)小鼠飲用含2％DSS的水一周后再給予含lmg／ml黃連素飲用水恢復(fù)四周作為DSSBer治療組。結(jié)果表明黃連素能促進(jìn)APC“葉小鼠體重的恢復(fù)且抑制實(shí)驗(yàn)后期小鼠體重的減輕。實(shí)驗(yàn)第五周末解剖結(jié)腸，觀察息肉形成情況并對(duì)其進(jìn)行病理切片分析，發(fā)現(xiàn)黃連素能有效抑制DSS模型組結(jié)腸息肉的數(shù)目和大小，改善結(jié)腸息肉的不典型增生程度。通過(guò)鼬一67染色和TUNEL熒光法檢測(cè)各組小鼠

5、結(jié)腸息肉和非息肉處組織的增殖和凋亡情況，發(fā)現(xiàn)DSS模型組非息肉處細(xì)胞的增殖能力高于對(duì)照組和DSSBer治療組，凋亡情況各組無(wú)明顯差異。息肉部位DSSBer治療組較DSS模型組細(xì)胞增殖減弱且凋亡增加。由此表明黃連素對(duì)DSS誘導(dǎo)的APCo葉小鼠體內(nèi)的結(jié)腸息肉具有抑制增殖、促進(jìn)其凋亡的作用。通過(guò)WesternBlot進(jìn)一步檢測(cè)到黃連素對(duì)增殖相關(guān)蛋白的PCNA和抗凋亡蛋白Bcl2的有下調(diào)作用。另外通過(guò)免疫組化和WesternBlot檢測(cè)了與腸癌