豬Toll樣受體9基因胞外區(qū)的克隆及其原核表達.pdf

1、當病原體入侵時，天然免疫是多細胞生物抵御病原體入侵，迅速控制感染的第一道防線。在脊椎動物，參與這種早期免疫反應的各種細胞和分子對其獲得性免疫的形成具有決定性作用。研究發(fā)現(xiàn)，哺乳動物Toll受體家族屬于細胞因子受體或模式識別受體，能夠激活類似但不完全相同的信號轉導途徑，從而發(fā)揮天然免疫和獲得性免疫調節(jié)作用，以抵御外來微生物或寄生蟲的感染。 本研究以植物血凝素(PHA)和脂多糖(LPS)共同刺激從豬脾臟和淋巴結分離的淋巴細胞，提取總

2、RNA，利用RT-PCR技術，在國內首次以分段克隆法，克隆出豬TLR9基因胞外區(qū)、胞內區(qū)序列，片段大小分別為1820bp、1700bp。通過序列分析所克隆的豬TLR9基因胞外區(qū)、胞內區(qū)的核苷酸序列和氨基酸序列與GenBank上的登載的序列的同源性分別為98﹪和100﹪。然后，將具有識別抗原物質功能與pGEX-4T-1連接后轉化大腸桿菌，經酶切、PCR和測序鑒定后，用ITPG誘導表達，表達產物經SDS-PAGE電泳進行分析，結果表明，表達