腰痛小關(guān)節(jié)因素的基礎(chǔ)與臨床研究.pdf

1、目的:研究腰椎脊后神經(jīng)內(nèi)側(cè)支的臨床應(yīng)用解剖,腰椎小關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎動(dòng)物模型制備,腰椎小關(guān)節(jié)退變疼痛的動(dòng)物模型制備和小關(guān)節(jié)退變中Hedgehog信號(hào)通路初步研究。
　　方法:1、觀察12具尸體標(biāo)本腰椎脊后神經(jīng)內(nèi)側(cè)支走行和骨纖維管結(jié)構(gòu)。并測(cè)量脊后神經(jīng)分內(nèi)、外側(cè)支處至橫突根部上緣的距離,內(nèi)側(cè)支在橫突根部至后正中線和體表距離,骨纖維管中點(diǎn)至后正中線和體表的距離。2、60只SD大鼠隨機(jī)選取一側(cè)腰椎小關(guān)節(jié)(L5-6),關(guān)節(jié)內(nèi)注入完全弗氏佐劑,為

2、實(shí)驗(yàn)組;另一側(cè)腰椎小關(guān)節(jié)(L5-6),關(guān)節(jié)內(nèi)注入生理鹽水,為對(duì)照組。術(shù)后3天,7天,14天,21天和28天時(shí),測(cè)定小關(guān)節(jié)滑膜中TNF-α和IL-1β炎性因子的含量,并行甲苯胺藍(lán)染色和HE染色,并用OARSI評(píng)分系統(tǒng)評(píng)估關(guān)節(jié)軟骨退變程度。3、88只SD大鼠隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組40只,對(duì)照組40只,空白組8只。實(shí)驗(yàn)組為關(guān)節(jié)內(nèi)注入5μL的尿激酶型纖溶酶原激活物(urinary plasminogen activator,uPA),對(duì)照組為關(guān)節(jié)內(nèi)注入

3、5μL生理鹽水,空白組自然飼養(yǎng)不行手術(shù)干預(yù)。術(shù)前及術(shù)后第3、7、14、28、42、56天進(jìn)行機(jī)械縮爪閾值及熱刺痛閾值測(cè)量,并行腳印面積、站立時(shí)相持續(xù)時(shí)間、舉步時(shí)相持續(xù)時(shí)間和舉步速度的步態(tài)分析。術(shù)后第7、14、28、42、56天,隨機(jī)取實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組各8只大鼠行小關(guān)節(jié)軟骨甲苯胺藍(lán)染色OARSI評(píng)分對(duì)關(guān)節(jié)軟骨退變程度進(jìn)行評(píng)價(jià);滑膜HE染色行滑膜炎性評(píng)分;IL-1β、TNF-α和iNOS免疫組織化學(xué)染色并評(píng)分。4、收集手術(shù)切除的腰椎小關(guān)節(jié)標(biāo)本

4、共24例。依據(jù)Weishaupt影像分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)MRI影像資料分級(jí)。小關(guān)節(jié)軟骨甲苯胺藍(lán)染色、HE染色和免疫組織化學(xué)染色,行病理學(xué)評(píng)分。RT-PCR檢測(cè)Hedgehog信號(hào)通路靶基因GLI1、PTCH1、HHIP的mRNA水平。并進(jìn)行Weishaupt影像分級(jí)、病理評(píng)分和基因表達(dá)水平之間的相關(guān)性分析。
　　結(jié)果:1、脊后神經(jīng)分內(nèi)、外側(cè)支處至橫突根部上緣的距離為3.52~1.87mm;橫突根部至后正中線和體表距離分別是2.4~3.3cm

5、和3.1~4.6cm;骨纖維管中點(diǎn)與后正中線和體表距離分別是2.1~2.9cm和2.2~4.0cm。2、大體評(píng)分和OARSI評(píng)分示實(shí)驗(yàn)組高于對(duì)照組(P<0.05)?；ぶ蠺NF-α炎性因子在術(shù)后第3天、7天,IL-1β炎性因子在術(shù)后第3天、7天和14天,實(shí)驗(yàn)組高于對(duì)照組(P<0.05)。3、機(jī)械縮爪閾值和腳印面積術(shù)后第3天、7天、14天,實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組、空白比較,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);熱縮足反射潛伏期、站立時(shí)相持續(xù)時(shí)間、

6、舉步時(shí)相持續(xù)時(shí)間和舉步速度術(shù)后第3天、7天、14天、28天,實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組、空白比較,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。甲苯胺藍(lán)染色軟骨退變程度,依據(jù)OARSI評(píng)分,實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組組間比較,術(shù)后第7天、14天、28天、42天、56天,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。滑膜炎性程度評(píng)分術(shù)后第7天、14天、28天、42天、56天,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。IL-1β、TNF-α、iNOS表達(dá):實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組組間比較,術(shù)后

7、第7天、14天、28天、42天、56天,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。4、腰椎小關(guān)節(jié)病理OARSI評(píng)分與影像學(xué)Weishaupt分級(jí)呈正相關(guān)(P<0.01)。腰椎小關(guān)節(jié)影像學(xué)Weishaupt分級(jí)和腰椎小關(guān)節(jié)病理OARSI評(píng)分分別與GLI1, PTCH1和HHIP表達(dá)均呈正相關(guān)(P<0.01)。
　　結(jié)論:1、腰椎小關(guān)節(jié)的神經(jīng)主要由脊后神經(jīng)內(nèi)側(cè)支支配。2、大鼠腰椎小關(guān)節(jié)內(nèi)注射完全弗氏佐劑可誘導(dǎo)腰椎小關(guān)節(jié)退變,制備可用于腰椎