遼寧漢族群體HLA-A、B、C和DRB1等位基因分型及與神經(jīng)纖維瘤?、裥拖嚓P性研究.pdf

1、中國醫(yī)科大學博士學位論文遼寧漢族群體HLAA、B、C和DRB1等位基因分型及與神經(jīng)纖維瘤?、裥拖嚓P性研究姓名：韓世新申請學位級別：博士專業(yè)：皮膚病與性病學指導教師：宋芳吉20040401識的滲透，已經(jīng)從傳統(tǒng)血清學發(fā)展到現(xiàn)代分子生物學，從細胞水平的檢測提高到基因水平。PCR技術的產(chǎn)生，為分子生物學技術應用于壬IlA研究領域提供了有效的方法和捷徑。1991年第11屆國際組織相容性專題研討會之后，HLA血清學研究大體告一段落，全面轉入DNA分

2、型階段。序列特異性寡核苷酸探針(Sequencespecificoligonucleotideprobes，SSOP)方法于1986年由Saiki等人首先報道，用于檢測HLA—II類基因，具有靈敏度高，特異性好，結果精確、可靠，樣品需量小的優(yōu)點。由于I類抗原的等位基因遠比II類復雜，所需要的序列特異性寡核苷酸探針數(shù)量龐大，而且各等位基因之間存在序列共享現(xiàn)象，因此l臨床應用，尤其是大樣本量檢測，尚有一定的困難。由于HLA個體遺傳學差異的本

3、質是在編碼其抗原產(chǎn)物的基因水平上，所以分析HLA基因型無疑是對HLA型別分析的最準確的方法。其準確性遠高于血清學和細胞學分型，并已逐漸取代了前兩者的位置。測序分型技術用于HL～一DRBl、HLA—DQBI和DQAl分型，首先由Santamaria等于1992年報道，是最可靠的基因分型方法。目前只有通過測序方法才可準確證實新發(fā)現(xiàn)的HLA新等位基因。常用的測序分析方法包括DNA序列測定(DNAsequencing)和PCR擴增產(chǎn)物直接測序法

4、(Polymerasechainreaction—sequencebasedtyping，PCR—SBT)。神經(jīng)纖維瘤病I型(Neurofibromatosistype1，NFl)是源于神經(jīng)嵴細胞發(fā)育分化異常所致的常染色體顯性遺傳病，患病率約為1／3000～3500。臨床表現(xiàn)以神經(jīng)纖維瘤，牛奶咖啡斑等為特征，也可因顱內(nèi)腫瘤的出現(xiàn)伴有不同的神經(jīng)系統(tǒng)癥狀，以及出現(xiàn)與腫瘤無關的智力障礙，精神發(fā)育遲緩等癥狀。目前，國內(nèi)對NFIHLA多態(tài)住的研究

5、只見個案報道，國外對該病的研究則集中在基因突變類型等方面，對HLA多態(tài)性研究較少，有必要對其進行系統(tǒng)研究，總結其免疫遺傳學方面的規(guī)律，從而有助于探索其不同表型的發(fā)生機制。為此，我們做了如下工作：一、采用SSOP方法對遼寧漢族群體進行硼A—I類基因A、B、c位點進行高分辨率等位基因分型。二、采用PCRSBT方法對遼寧漢族群體進行HLAII類基因DRBl位點進行等位基因測序分型。三、采用SSOP和PCRSBT方法分別對NFl患者進行HLAI