2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:本研究根據(jù)編碼牙齦卟啉單胞菌(Porphyromonasgingivalis,P.gingivalis)主要毒力因子菌毛亞基-菌毛素fimA基因遺傳多態(tài)性,采用16SrRNA聚合酶鏈反應(yīng)(PolmeraseChainReaction,PCR)檢測青春期齦炎患者和青春期牙周健康者齦下菌斑中的P.gingivalis,運(yùn)用fimA引物特異性PCR對已檢出的P.gingivalis陽性標(biāo)本進(jìn)行fimA基因分型,并對各型菌株進(jìn)行超微結(jié)構(gòu)觀

2、察,旨在探查各fimA基因型P.gingivalis在青春期齦炎患者和青春期牙周健康者中的分布,并根據(jù)觀察的各fimA基因型P.gingivalis超微結(jié)構(gòu)特點(diǎn)探討其致病性差異的結(jié)構(gòu)機(jī)制。 材料與方法:研究對象入選者97例,其中青春期齦炎患者51例,青春期牙周健康者46例。選取切牙和第一磨牙為菌斑取樣部位。選取前期培養(yǎng)的脫脂牛奶保存的P.gingivalis臨床野生菌株,作為擬觀察超微結(jié)構(gòu)的待檢菌體。 常規(guī)酚-氯仿法提取

3、齦下菌斑中全細(xì)菌及各菌體DNA。紫外分光光度儀測定DNA濃度。用P.gingivalis16SrRNA和各fimA基因型特異引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,2.0%瓊脂糖凝膠水平電泳檢測擴(kuò)增產(chǎn)物,在預(yù)期片段上出現(xiàn)條帶為陽性,否則為陰性。對檢出的各fimA基因型P.gingivalis制備超薄切片,在透射電鏡下觀察菌體表面結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,χ2檢驗(yàn)分析P.gingivalis在青春期齦炎組和青春期牙周健康組齦下菌斑

4、中檢出率的差異,CochranArmitage趨勢檢驗(yàn)分析齦炎組和健康組P.gingivalis檢出率隨年齡變化的趨勢,檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)α=0.05。所有實(shí)驗(yàn)樣本的測定均在盲法下進(jìn)行,并隨機(jī)抽取10%的樣本做重復(fù)性實(shí)驗(yàn),檢測PCR結(jié)果的可靠性。結(jié)果:1、青春期齦炎患者齦下菌斑中P.gingivalis檢出率為74.5%,青春期牙周健康者中為30.4%,兩組檢出率的差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);對P.gingivalis檢出率隨年齡增加

5、而增加的趨勢進(jìn)行χ2檢驗(yàn),結(jié)果在齦炎組(P<0.05)和健康組(P<0.01)均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 2、在青春期齦炎患者和青春期牙周健康者齦下菌斑中均檢出多種fimA基因型P.gingivalis。在齦炎組各fimA基因型P.gingivalis的總檢出率:Ⅰ型34.2%,Ⅱ型55.3%,Ⅳ型18.4%,Ⅲ型和Ⅴ型未檢出;另有7例(占18.4%)未分出型別。在健康組各fimA基因型P.gingivalis的總檢出率:Ⅰ型14.3%

6、Ⅱ型85.7%,Ⅲ型14.3%,Ⅳ型28.6%,Ⅴ型未檢出;另有2例(占14.3%)未分出型別。 3、fimA基因Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅳ型P.gingivalis的菌毛存在差別:Ⅰ型和Ⅱ型菌體表面有放射狀菌毛,Ⅱ型略顯致密,Ⅳ型表面未見明顯菌毛。同時(shí)也觀察到各型莢膜存在差別:Ⅰ型莢膜最厚,Ⅳ型莢膜較薄,Ⅱ型莢膜最薄。 結(jié)論:1、P.gingivalis與青春期齦炎有關(guān)。 2、P.gingivalis檢出率在青春期隨年齡增

7、長有增高趨勢。 3、青春期齦炎患者和青春期牙周健康者齦下菌斑中P.gingivalis存在fimA基因多態(tài)性。fimA基因Ⅱ型是其主要存在的基因型,其次是Ⅰ型和Ⅳ型,Ⅲ型和Ⅴ型較少或不能檢出。 4、青春期齦炎患者和青春期牙周健康者齦下菌斑中存在按現(xiàn)有fimA基因分型未能定型的P.gingivalis菌株。 5、fimA基因Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅳ型P.gingivalis的菌毛和莢膜存在較大差別,推測其粘附、侵入或其它致病

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