牙齦卟啉單胞菌FimA蛋白和IL-15真核共表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建與鑒定.pdf

1、山東大學(xué)碩士學(xué)位論文牙齦卟啉單胞菌FimA蛋白和IL15真核共表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建與鑒定姓名：郭紅梅申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：口腔內(nèi)科學(xué)指導(dǎo)教師：楊丕山20040410山東大學(xué)碩士學(xué)位論文牙齦卟啉單胞菌FiIIlA蛋白和Ih15真核共表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建與鑒定專業(yè)：口腔臨床醫(yī)學(xué)研究生：郭紅梅導(dǎo)師：楊丕山中文摘要目的：牙周病是人類口腔中兩大最常見的疾病之一。牙齦卟啉單胞菌(Porphyromonasgingivalis，Pg)是慢性牙周炎的主要致病菌，

2、牙齦卟啉單胞菌菌毛蛋白(fimbrillin，F(xiàn)imA)在其致病過程中起重要作用。FimA可以凝集人或某些動(dòng)物的紅細(xì)胞，可介導(dǎo)Pg粘附于上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、唾液成分，也與該菌侵入到牙周組織的上皮細(xì)胞及結(jié)締組織內(nèi)有關(guān)，而且可刺激致炎性細(xì)胞因子(IL—i、TNF一Ⅱ、IL一6、IL一8)的產(chǎn)生，導(dǎo)致骨質(zhì)吸收和其它炎癥反應(yīng)，是Pg引起牙周病交的主要毒力因子之一。Fimh可以作為一種重要的疫苗抗原來防治牙周病。在口腔環(huán)境中防御病原入侵的免疫球蛋

3、自主要是分泌型IgA(SIgA)，IL一15可以特異的作用于被抗原致敏的B1細(xì)胞向產(chǎn)生IgA細(xì)胞的轉(zhuǎn)型分化，可以作為增強(qiáng)IgA應(yīng)答的免疫調(diào)節(jié)因子。本實(shí)驗(yàn)的目的就是構(gòu)建牙齦卟啉單胞菌FiIfIA蛋白和IL一15的真核共表達(dá)質(zhì)粒，作為增強(qiáng)SIgA應(yīng)答的抗牙周病DNA疫苗，為將來進(jìn)行免疫動(dòng)物實(shí)驗(yàn)奠定基礎(chǔ)。方法：l_設(shè)計(jì)fimh引物，自pcDNA3一fimA質(zhì)粒PCR擴(kuò)增fimA基因，PCR產(chǎn)物TA克隆。分別對(duì)fimA和真核表達(dá)質(zhì)粒plRES以