海藻糖抑制淀粉質(zhì)β多肽聚集的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、伴隨著全球人口老齡化步伐的加快，阿爾滋海默癥（AD）的發(fā)病人數(shù)逐年劇增，已經(jīng)僅次于癌癥和心臟病。目前，阿爾茲海默癥成為危害人類健康和生活質(zhì)量的第三大殺手。由于AD的發(fā)病是淀粉質(zhì)多肽（Aβ）聚集的后果，而Aβ16-22又是Aβ聚集的重要疏水性核心，因此具有重要研究?jī)r(jià)值。 為了觀察Aβ在聚集過程中各種聚集體和寡聚體的形成特點(diǎn)和海藻糖對(duì)聚集的抑制作用，本文以Aβ16-22作為模型多肽，利用毛細(xì)管電泳法分別考察在水溶液和海藻糖溶液的Aβ

2、16-22聚集過程及聚集過程中寡聚體的形成特點(diǎn)；并利用質(zhì)譜和超濾方法對(duì)不同時(shí)間的培養(yǎng)產(chǎn)物進(jìn)行了鑒定；同時(shí)利用透射電鏡對(duì)海藻糖抑制聚集的作用及對(duì)聚集過程的影響進(jìn)行了表觀形貌的觀察，得到以下結(jié)果。 首先，利用毛細(xì)管電泳考察了Aβ16-22的性質(zhì)。發(fā)現(xiàn)其具有很強(qiáng)的疏水性和較高的等電點(diǎn)（pI=10-11），由此特點(diǎn)要求毛細(xì)管電泳需在較低的pH值條件下（pH2.3的40 mM的磷酸緩沖液）進(jìn)行，以實(shí)現(xiàn)樣品的完全分離。 第二，分析A

3、β16-22不同培養(yǎng)時(shí)間產(chǎn)物的毛細(xì)管電泳結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在合適的條件下，應(yīng)用毛細(xì)管電泳能使多肽的不同寡聚體分開，甚至得到基線分離。用質(zhì)譜和超濾的方法對(duì)多肽的聚集體進(jìn)行鑒定，得出多肽的寡聚體中有分子量為3755的四聚體的存在。 第三，考察了海藻糖對(duì)Aβ16-22聚集的影響。分別用毛細(xì)管電泳方法和透射電鏡成像法考察了不同濃度海藻糖對(duì)多肽聚集的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，海藻糖對(duì)Aβ16-22聚集有很強(qiáng)的抑制效果。在不加海藻糖的培養(yǎng)物中，培養(yǎng)3天時(shí)，單