海藻糖抑制淀粉質(zhì)β多肽聚集的實驗研究.pdf

1、伴隨著全球人口老齡化步伐的加快，阿爾滋海默癥（AD）的發(fā)病人數(shù)逐年劇增，已經(jīng)僅次于癌癥和心臟病。目前，阿爾茲海默癥成為危害人類健康和生活質(zhì)量的第三大殺手。由于AD的發(fā)病是淀粉質(zhì)多肽（Aβ）聚集的后果，而Aβ16-22又是Aβ聚集的重要疏水性核心，因此具有重要研究價值。 為了觀察Aβ在聚集過程中各種聚集體和寡聚體的形成特點和海藻糖對聚集的抑制作用，本文以Aβ16-22作為模型多肽，利用毛細(xì)管電泳法分別考察在水溶液和海藻糖溶液的Aβ

2、16-22聚集過程及聚集過程中寡聚體的形成特點；并利用質(zhì)譜和超濾方法對不同時間的培養(yǎng)產(chǎn)物進(jìn)行了鑒定；同時利用透射電鏡對海藻糖抑制聚集的作用及對聚集過程的影響進(jìn)行了表觀形貌的觀察，得到以下結(jié)果。 首先，利用毛細(xì)管電泳考察了Aβ16-22的性質(zhì)。發(fā)現(xiàn)其具有很強的疏水性和較高的等電點（pI=10-11），由此特點要求毛細(xì)管電泳需在較低的pH值條件下（pH2.3的40 mM的磷酸緩沖液）進(jìn)行，以實現(xiàn)樣品的完全分離。 第二，分析A

3、β16-22不同培養(yǎng)時間產(chǎn)物的毛細(xì)管電泳結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在合適的條件下，應(yīng)用毛細(xì)管電泳能使多肽的不同寡聚體分開，甚至得到基線分離。用質(zhì)譜和超濾的方法對多肽的聚集體進(jìn)行鑒定，得出多肽的寡聚體中有分子量為3755的四聚體的存在。 第三，考察了海藻糖對Aβ16-22聚集的影響。分別用毛細(xì)管電泳方法和透射電鏡成像法考察了不同濃度海藻糖對多肽聚集的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，海藻糖對Aβ16-22聚集有很強的抑制效果。在不加海藻糖的培養(yǎng)物中，培養(yǎng)3天時，單