人胰島淀粉樣多肽毒性聚集的抑制劑研究.pdf

1、淀粉樣蛋白聚集性疾病是一種由蛋白質通過非正常折疊后，在體內逐漸形成纖維沉積所引起的疾病。目前已發(fā)現(xiàn)20多種淀粉樣疾病，如阿爾茲海默病、帕金森綜合癥以及2型糖尿病等。產生各種淀粉樣沉積的蛋白質稱為淀粉樣蛋白，常見的主要包括阿爾茲海默病中的beta淀粉樣蛋白（amyloid beta，A），帕金森綜合癥中的突觸核蛋白（-synuclein）和2型糖尿病中的人胰島淀粉樣多肽（human islet amyloid polypeptide，hI

2、APP）等。
　　hIAPP是2型糖尿病患者胰島內形成的淀粉沉積的主要組成之一。hIAPP能夠在體內形成淀粉樣沉積，體現(xiàn)出較強的聚集能力，是截止到現(xiàn)在已知的聚集能力最強的淀粉樣多肽之一。一般情況下，hIAPP具有減緩腸胃食物排空，降低食欲等正常功能，同時能與胰島素、胰高血糖素等激素一起準確調節(jié)體內血糖水平等功能。在病理條件下，hIAPP在胰島形成的淀粉樣沉積能夠通過誘導細胞內氧化應激、內質網(wǎng)應激以及線粒體損傷等方式誘導細胞死亡、破

3、壞胰島正常生理作用，最終引發(fā)2型糖尿病病變。因此，hIAPP在特殊條件下誘發(fā)的胰島內纖維聚集被認為是T2DM的主要致病原因之一。
　　目前越來越多的研究逐漸轉移到淀粉樣蛋白聚集抑制劑方面，不僅因為聚集抑制劑在預防及治療淀粉樣疾病方面的潛在作用，同時抑制劑的研究還有利于淀粉樣蛋白聚集具體機制的研究。目前已有大量關于阿爾茲海默病中beta-amyloid（Aβ）聚集抑制劑的研究，其中一些抑制劑已經(jīng)處于臨床Ⅱ期或Ⅲ期研究階段，如沒食子兒

4、茶素沒食子酸酯（EGCG）、PTB2和RS0406等。而目前，國內外對于hIAPP的聚集抑制劑研究則較少。因此，在本論文中，將研究一些天然產物及中藥活性成分對hIAPP聚集性的影響。
　　咖啡酸和綠原酸是咖啡中的主要活性成分。流行病學研究顯示長期飲用咖啡與糖尿病患病風險率成反比例關系。研究結果顯示，咖啡酸和綠原酸能夠顯著抑制hIAPP單體聚集以及延緩其聚集過程中二級結構的轉變。利用光催化交聯(lián)反應和動態(tài)光散射檢測，發(fā)現(xiàn)咖啡酸和綠原酸

5、能夠抑制人胰島淀粉樣多肽毒性寡聚體的形成。通過MTT細胞毒性實驗，發(fā)現(xiàn)咖啡酸和綠原酸能夠提高INS-1細胞存活率。
　　水飛薊賓是中藥水飛薊中的常見的主要組成之一。研究顯示水飛薊賓在抗癌和腫瘤預防以及抗糖尿病等方面顯示出良好的開發(fā)潛力，已經(jīng)被廣泛應用于醫(yī)藥、保健品、食品等產品中。本論文結果顯示水飛薊賓能夠通過阻礙hIAPP毒性寡聚體形成從而抑制其纖維形成以及提高INS-1細胞存活率。
　　丹參是治療糖尿病中藥復方的一種常見成

6、分，其主要活性組成為多酚類化合物丹酚酸B。研究表明丹酚酸B具有抗氧化以及改善細胞氧化應激活等活性功能。研究結果發(fā)現(xiàn)丹酚酸B劑量依賴性地抑制hIAPP淀粉樣聚集同時能夠將成熟的纖維降解成可溶性的無定形結構。未修飾蛋白光催化交聯(lián)實驗顯示丹酚酸B能夠阻斷hIAPP的寡聚體形成。紅細胞溶血、POPG膜模擬實驗以及MTT等實驗顯示丹酚酸B可以通過緩解hIAPP誘導的細胞膜損傷及線粒體功能紊亂來提高INS-1細胞存活率。
　　本論文從常見中藥