三七莖葉中黃酮類化合物初步研究.pdf

1、闡述了黃酮類化合物的藥理作用、提取、含量測(cè)定、分離及結(jié)構(gòu)鑒定的方法，介紹了中藥三七中的化學(xué)成分及其研究進(jìn)展，對(duì)三七莖葉中的黃酮類化合物進(jìn)行了系統(tǒng)的研究。 （1）用乙醇作溶劑，用索氏提取器進(jìn)行提取，采用硝酸鋁—亞硝酸鈉比色法測(cè)定總黃酮含量，以總黃酮的提取率為指標(biāo)，確定了三七莖葉中黃酮類化合物的最佳醇提工藝條件即：用70％乙醇溶劑提取4h總黃酮提取率最高，三七葉中的黃酮含量為13.55 mg/g DW，莖中的含量為7.28 mg/g

2、 DW，莖和葉所含的黃酮類物質(zhì)的成分有差異。通過(guò)硝酸鋁—亞硝酸鈉顯色穩(wěn)定性試驗(yàn)，確定顯色后15~40分鐘之間是三七葉片總黃酮含量測(cè)定的最佳時(shí)段。此外，本實(shí)驗(yàn)還對(duì)三七莖葉黃酮提取液進(jìn)行了各種定性顏色反應(yīng)，初步確定其中的黃酮類物質(zhì)主要為黃酮醇及其甙類。 （2）采用正交試驗(yàn)方法，確定了堿水法和微波—堿水法提取三七莖葉總黃酮的最佳工藝即：堿水法的提取工藝為：用pH=10的稀堿液作溶劑，液料比30 ：1，浸提溫度80℃，提取2次，每次40

3、分鐘。微波-堿水法提取三七莖葉總黃酮的最佳工藝為：pH為8，微波功率為中檔，料液比為1g ：40ml， 微波作用時(shí)間為10min。提取2次。由于微波-堿水法用于三七葉總黃酮的提取具有省時(shí)、高效、節(jié)能的優(yōu)點(diǎn)，提取率高于醇提法和堿水法，所以本文采用該法作為最佳提取方法。 （3）首先用殼聚糖對(duì)三七莖葉的水提取液進(jìn)行澄清處理，其最佳工藝為：殼聚糖配制的澄清劑的添加量為提取液體積的0.9％，靜置2小時(shí)，pH值調(diào)節(jié)為6，溫度為室溫。然后用A

4、B-8樹(shù)脂進(jìn)行純化，其工藝參數(shù)為：70％乙醇水溶液作洗脫劑，洗脫速度為2BV/h，洗脫劑用量為5倍量樹(shù)脂體積。 （4）總黃酮用聚酰胺柱進(jìn)行分離，得到三個(gè)三七莖葉黃酮組分，經(jīng)過(guò)硅膠薄層色譜、顯色法及紫外光譜的鑒定，結(jié)合相關(guān)的文獻(xiàn)分析，初步確定三七莖葉中所含的黃酮類化合物分別是槲皮素、槲皮素—3—O—糖甙和山奈酚—3—O—糖甙。 （5）三七莖葉總黃酮對(duì)人肝癌細(xì)胞SMMC-7721增殖有抑制作用，改變SMMC-7721細(xì)胞的周