S-炔丙基半胱氨酸緩控釋劑(CR-SPRC)對心力衰竭大鼠的保護作用及其分子機制.pdf

1、目的:心力衰竭的發(fā)病率近十年明顯增高，冠狀動脈左前降支被結扎后的缺血刺激，氧化應激等均會導致大量凋亡因子的釋放，從而導致心肌細胞的壞死及啟動心肌細胞的凋亡。近幾年的研究表明，心肌細胞的凋亡和氧化在心衰的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著重大作用，而心肌細胞形態(tài)和功能的最終喪失是心臟走向代償失調的根本原因。硫化氫是人們發(fā)現(xiàn)的第三個重要內源性氣體信號傳導分子，在心血管系統(tǒng)中具有促進血管新生、抑制心肌重構、保護心肌等功能。但由于它不穩(wěn)定易揮發(fā)難以準確給藥等弊端

2、，導致其在臨床上很難發(fā)展。而內源性硫化氫的供體炔丙基半胱氨酸(SPRC)可調節(jié)內源性硫化氫的生成，抑制心肌細胞凋亡和左心室重構，對心肌梗死的發(fā)生有預防和治療作用。它屬于生物藥劑學分類系統(tǒng)(BCS)I類藥物，具有高溶解度和高滲透性，轉運機制為膜孔轉運，口服吸收較好，適合開發(fā)為口服給藥制劑。但SPRC半衰期較短并具有刺激性氣味，為延長其在體內作用時間，產生更穩(wěn)定更持久的H2S，并降低刺激性，我們改進了劑型，使用尤特奇RS30D作為載體制備S

3、PRC緩控釋劑(CR-SPRC)，并探討CR-SPRC對大鼠心肌梗死后心力衰竭的保護作用及相關分子機制，同時也初步探究血管新生在CR-SPRC心臟保護作用中可能扮演的角色。
　　方法:體外采用模擬人工胃測緩釋曲線，體內使用藥代動力學方法測24小時的血藥濃度。主實驗是制備心衰模型進行藥效和機制的探究:采用結扎大鼠冠狀動脈左前降支制備急性心肌梗死模型，結扎術后心梗的大鼠通常于術后2周時發(fā)生心力衰竭（HF）。我們將術后48h存活大鼠隨機

4、分為以下7組并給藥6周:(1)Sham組;(2)HF組;(3)HF+SPRC組;(4)HF+CR-SPRC組;(5)HF+CR-SPRC+炔丙基甘氨酸(PAG)組;(6) HF+PAG組;(7) HF+Digoxin陽性藥組。治療期間觀察大鼠的體重變化及存活率，6周后進行超聲心動圖檢查，測定LVID、LVPW、LVAW、EF、FS等指標。并經右頸總動脈插管，采用硫酸鋇造影法觀測心臟的血管數量。采用TTC染色法和Masson染色法檢測心臟

5、梗死面積及心肌纖維化面積。取血漿測H2S濃度，取左室梗死周邊區(qū)和血漿測SOD、CK、CAT及GSH的水平。通過Western blot觀察CR-SPRC對凋亡存活相關因子(bcl-2、bax、caspase-3、caspase-9)，ST2信號通路以及胱硫醚-Υ-裂解酶(CSE)蛋白表達的影響。
　　結果:CR-SPRC在體內體外都能夠緩慢釋放，體外8小時釋放完全，體內6小時達到峰值。CR-SPRC能明顯提高大鼠的存活率，降低心衰

6、大鼠的心臟梗死面積及左室纖維化面積。同時CR-SPRC能提高左室射血分數，降低左室內徑指數，提高心衰大鼠的心功能。CR-SPRC亦能促進心臟中的血管新生，尤其能促進結扎部位周圍的血管的形成。CR-SPRC這一系列的心臟保護作用皆優(yōu)于普通SPRC。CR-SPRC可以增加血清中H2S濃度，以及梗死周邊區(qū)中CSE蛋白表達，且作用強度高于普通SPRC。在抗氧化及抗凋亡的保護機制方面，CR-SPRC可抑制細胞的CK漏出，并維持GSH，CAT和SO