子宮內膜癌蛋白質組的差異表達分析及意義.pdf

1、目的：運用蛋白質組學雙向凝膠電泳和質譜技術，研究子宮內膜癌組織與正常子宮內膜組織蛋白質組表達圖譜的差異，尋找和確定子宮內膜癌差異表達蛋白質，分析其中與子宮內膜癌相關蛋白質，為進一步研究子宮內膜癌的發(fā)生發(fā)展機制奠定基礎。 方法: 1、雙向凝膠電泳分離子宮內膜癌組織與正常子宮內膜組織的總蛋白。 2、用ImgemMster圖像分析軟件檢測雙向電泳實驗的重復性和差異表達蛋白。 3、應用質譜鑒定所篩查的差異表達蛋白

2、。 4、應用RT-PCR技術對篩選出的部分差異表達蛋白在mRNA水平進行驗證。 結果: 1、獲得穩(wěn)定的高分辨率和重復性的子宮內膜癌組織與正常子宮內膜組織雙向電泳圖譜。測得子宮內膜癌組織與正常子宮內膜組織各3塊凝膠的平均蛋白質點數(shù)分別為1556±38和1657±31。 2、子宮內膜癌組織與正常子宮內膜組織相比較，經(jīng)雙向凝膠電泳軟件分析，共找到27個差異表達的蛋白質，其中22個蛋白質在子宮內膜癌組織中含量增加

3、，5個蛋白質含量減低。 3、對差異蛋白質進行質譜鑒定，質譜鑒定出15種與子宮內膜癌相關的差異蛋白質，其中13種在子宮內膜癌組織中表達上調的蛋白質為p48，烯醇酶，ATP合酶，膜聯(lián)蛋白，蛋白質延長因子-α1，Unknown(protein for IMAGE：3897065)，硫氧還蛋白過氧化物酶6，加帽蛋白Cap G，焦磷酸酶1，過氧化物歧化酶突變體Q143n，蛋白質二硫化物異構酶A3(PDIA3)前體，丙酮酸激酶M1/M2，亮

4、氨酸氨基肽酶，2種在子宮內膜癌組織中表達下調的蛋白質為Stathmin 1，α1-抗胰蛋白酶。 4、通過RT—PCR技術在基因水平對p48，烯醇酶，ATP合酶，膜聯(lián)蛋白，蛋白質延長因子1-α1，Stathminl這6個蛋白質的mRNA表達水平進行驗證，結果與質譜結果一致。 結論: 1、應用蛋白質組學研究方法篩選鑒定出15種與子宮內膜癌癌變相關的蛋白質，這些蛋白涉及能量代謝相關的多種酶、抗氧化相關蛋白、細胞增殖調控蛋白以及