小鼠消化道上皮部分細(xì)胞剔除Smad4基因引發(fā)胃腸道腺瘤.pdf

1、TGF-β超家族分子在調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、分化、遷移、黏附和凋亡過(guò)程中起到重要作用。Smad4分子是TGF-β超家族分子信號(hào)通路的中心介導(dǎo)者。由于Smad4基因剔除小鼠死于胚胎早期，因此利用組織特異性的Cre重組酶轉(zhuǎn)基因小鼠與Smad4基因打靶小鼠進(jìn)行組織特異性基因剔除的研究。 在利用白蛋白啟動(dòng)子獲得肝細(xì)胞特異性表達(dá)Cre重組酶轉(zhuǎn)基因小鼠的同時(shí)，也得到了在消化道上皮細(xì)胞中特異性表達(dá)Cre重組酶的轉(zhuǎn)基因小鼠。首先，利用PCR和LacZ染

2、色的方法對(duì)白蛋白啟動(dòng)子介導(dǎo)的Cre重組酶轉(zhuǎn)基因小鼠(Alb-Cre-2)中Cre重組酶的組織分布及其在體內(nèi)介導(dǎo)基因重組的作用進(jìn)行了鑒定。結(jié)果顯示，Cre重組酶在轉(zhuǎn)基因小鼠15％的肝細(xì)胞，自胃腺峽部向上部分成熟的壁細(xì)胞，空腸潘氏細(xì)胞，回腸、盲腸及結(jié)腸中的分泌型細(xì)胞中特異性地表達(dá)。 利用病理學(xué)手段對(duì)肝臟和消化道特異性Smad4基因剔除小鼠進(jìn)行了初步的表型分析。發(fā)現(xiàn)該突變小鼠出生后1．5-6．5月齡間出現(xiàn)多發(fā)性胃腸道腫瘤，腫瘤占位性病

3、變引發(fā)小鼠營(yíng)養(yǎng)不良致死。胃、小腸、盲腸、結(jié)腸和直腸的腫瘤發(fā)生率分別為91．30％、13．04％、34．78％、56．52％和21．74％。小鼠肝臟無(wú)異常，組織病理學(xué)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)小鼠的胃腸道腫瘤均為腺瘤。其病理學(xué)改變?nèi)缌馨图?xì)胞浸潤(rùn)，基質(zhì)細(xì)胞增生，上皮細(xì)胞化生、壞死，以及可見(jiàn)典型的戒印細(xì)胞，均與已報(bào)道的Smad4突變引起的人類家族性青少年息肉癥相吻合。腺胃頂細(xì)胞區(qū)域在細(xì)胞數(shù)量不變的情況下顯著拉長(zhǎng)，提示在壁細(xì)胞中完全剔除Smad4基因可能對(duì)腺胃上