解毒化瘀顆粒對(duì)急性肝衰竭大鼠LPS-TLR4信號(hào)傳導(dǎo)通路負(fù)反饋調(diào)節(jié)因子影響的研究.pdf

1、目的:通過多中心臨床研究明確解毒化瘀顆粒治療肝衰竭患者內(nèi)毒素血癥的療效作用。在此基礎(chǔ)上，運(yùn)用D-氨基半乳糖+內(nèi)毒素構(gòu)建大鼠急性肝衰竭模型，探討解毒化瘀顆粒對(duì)急性肝衰竭大鼠LPS/TLR4信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路負(fù)反饋調(diào)節(jié)因子的調(diào)節(jié)作用。
　　 方法:采用多中心、隨機(jī)、對(duì)照研究，將符合診斷標(biāo)準(zhǔn)的110例慢性肝衰竭患者隨機(jī)分為治療組與對(duì)照組。治療組在西醫(yī)綜合治療的基礎(chǔ)上加用解毒化瘀顆粒，對(duì)照組只予西醫(yī)綜合治療。采用全自動(dòng)生化檢測(cè)系統(tǒng)測(cè)血清TBI

2、L、 DBIL、ALT、 AST、PTA含量，鱟試劑法檢測(cè)LPS含量，雙抗體夾心(ELISA)法測(cè)定TNF-α、IL-6、IL-10、IL-12表達(dá)。運(yùn)用D-氨基半乳糖+內(nèi)毒素構(gòu)建大鼠急性肝衰竭模型。將Wistar大鼠200只，隨機(jī)分為4組:空白組50只、模型對(duì)照組50只、解毒化瘀顆粒組50只、E5531組50只;造模前5天開始灌胃給藥，2次/d，間隔12h，一直延續(xù)至成模后24h;分別在造模成功后(0h、3h、6h、12h、24h)5

3、個(gè)不同的時(shí)間點(diǎn)，每組隨機(jī)取8只大鼠，運(yùn)用Western blot檢測(cè)肝組織TLR4蛋白表達(dá)，RT-PCR技術(shù)檢測(cè)枯否細(xì)胞TLR4、IRAK-M、MyD66s、A20 mRNA表達(dá)，ELISA技術(shù)檢測(cè)血清TNF-α、IL-6、TGF-β、IL-10含量。同時(shí)觀察大鼠36h存活率。
　　 結(jié)果:解毒化瘀顆粒能改善慢性肝衰竭患者預(yù)后，降低病死率，減少并發(fā)癥的發(fā)生。有降低血清內(nèi)毒素含量的治療效果，同時(shí)抑制促炎因子表達(dá)，提高抗炎因子表達(dá)，

4、改善患者全身系統(tǒng)炎癥反應(yīng)。實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)一步證明，解毒化瘀顆粒能降低急性肝衰竭大鼠血清內(nèi)毒素含量，抑制促炎因子表達(dá)，提高抗炎因子表達(dá)，治療效果優(yōu)于E5531。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，解毒化瘀顆粒通過降低TLR4mRNA表達(dá)，上調(diào)節(jié)IRAK-M、MyD88smRNA表達(dá)。
　　 結(jié)論:(1)肝衰竭患者均有不程度的內(nèi)毒素血癥，LPS/TLR4信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在肝衰竭“內(nèi)毒素打擊”中扮演重要角色。(2)解毒化瘀顆粒通過降低血清內(nèi)毒素含量，抑制促炎因子