大鼠慢性內(nèi)臟感覺過敏的病理生理研究.pdf

1、第一部分慢性內(nèi)臟感覺過敏大鼠模型的建立及其病理生理;目的:①探討結(jié)直腸機械刺激的慢性內(nèi)臟感覺過敏大鼠模型建立;②研究慢性內(nèi)臟感覺過敏模型大鼠的腸道感覺和運動功能.方法①新生SD大鼠,分為模型組(n=29)和對照組(n=29),8~21天日齡的模型組幼鼠每天接受結(jié)直腸擴張(壓力60mmHg,60秒,每天兩次),對照組僅用導管在肛門周圍輕微接觸.在8~10周齡用自制氣囊擴張大鼠降結(jié)腸和直腸,觀察動物的腹壁回撤反射(AWR)測量內(nèi)臟感覺;②觀

2、察5小時的糞便重量和腹瀉指數(shù);③采用離體平滑肌條器官浴槽實驗方法,觀察模型大鼠和對照大鼠升結(jié)腸和降結(jié)腸的縱行和環(huán)行平滑肌條對氨甲酰膽堿的收縮反應.結(jié)果①AWR評分可以反映擴張壓力的大小(P<0.01);②模型組在40、60、80mmHg的擴張壓力下,AWR評分明顯高于對照組(1.958±0.16 vs 1.358±0.155,2.82±0.128vs2.172±0.137,3.206±0.14vs2.593±0.141,P<0.01).

3、③模型組和對照組大鼠5小時觀察期的平均糞便重量為:2.48±1.46g vs1.98±1.37g,P>0.05;平均腹瀉指數(shù)為0.45±0.49vs0.36±0.64,P>0.05.兩組平均糞便重量和平均腹瀉指數(shù)均無顯著性差異.④模型組和對照組大鼠的平滑肌條對氨甲酰膽堿(1μM/L)刺激均出現(xiàn)收縮反應,兩組各肌條對刺激的收縮反應均無顯著性差異,升結(jié)腸縱行平滑肌條(n=7)收縮變化百分數(shù)分別為:33.54±12.44％vs 46.44±1

4、0.82％,P>0.05;環(huán)行肌條(n=6)分別為:31.21±8.043％vs 37.59±11.25％,P>0.05;降結(jié)腸縱行平滑肌條(n=10)變化百分數(shù)分別為:51.24±12.82％vs55.17±7.23％,P>0.05;環(huán)行肌條(n=10)分別為:54.50±7.173％vs 45.66±4.89％,P>0.05.結(jié)論①新生大鼠給予結(jié)直腸機械刺激在成年后可出現(xiàn)慢性內(nèi)臟感覺過敏;②該模型可能僅影響腸道感覺功能,而運動功能不

5、受影響.第二部分替加色羅對大鼠胃腸道功能的調(diào)節(jié);第一節(jié)替加色羅對慢性內(nèi)臟感覺過敏大鼠模型的抗傷害性感覺作用;目的:研究替加色羅對慢性內(nèi)臟感覺過敏模型大鼠內(nèi)臟感覺的調(diào)節(jié)作用.方法選取8~10周齡已建立的雄性模型大鼠為藥物模型組(n=8),對照組大鼠分為藥物對照組(n=9)和溶媒對照組(n=12),觀察藥物模型組和藥物對照組腹腔注射替加色羅前后、溶媒對照組注射等量溶媒前后的AWR評分.結(jié)果除20mmHg外,在40,60,80mmHg擴張壓力

6、下,藥物模型組的AWR評分在用藥后較用藥前明顯降低,分別為:1.95±0.5 vs 1.32±0.55,3.05±0.48vs2.32±0.54,3.25±0.63 vs 2.77±0.51,P<0.05.在20,40,60,80mmHg擴張壓力下,藥物對照組的用藥前后AWR評分分別為:0.06±0.14 vs 0.17±0.21,1.15±0.70vs1.02±0.63,2.06±0.56vs2.00±0.61,2.31±0.67 v

7、s 2.33±0.66,P>0.05;溶媒對照組的用藥前后AWR評分分別為:0.28±0.58vs0.38±0.43,1.35±0.79vs1.21±0.65,2.48±0.80 vs 2.18±0.71,2.6±0.85 vs 2.50±0.76,P>0.05,均無顯著性差異.結(jié)論替加色羅提高慢性內(nèi)臟感覺過敏模型大鼠對結(jié)直腸擴張的疼痛閾值,降低內(nèi)臟感覺的敏感性,具有抗傷害性感覺作用.第二節(jié)替加色羅對大鼠結(jié)直腸平滑肌條自發(fā)性活動的影響;

8、目的:探討替加色羅對大鼠結(jié)直腸平滑肌活動的影響.方法采用離體平滑肌條器官浴槽實驗方法,觀察替加色羅對大鼠升結(jié)腸、降結(jié)腸和直腸的縱行和環(huán)行平滑肌條自發(fā)性收縮活動的影響.結(jié)果①替加色羅對各部位平滑肌條自發(fā)性收縮活動均表現(xiàn)為抑制作用,藥物的作用呈濃度依賴性,其親和力指數(shù)(pD<,2>)在升結(jié)腸縱行和環(huán)行肌條分別為:5.907±0.173、5.993±0.198;降結(jié)腸縱行和環(huán)行肌條為;6.032±0.147、5.963±0.087;直腸縱行和

9、壞行肌條為:6.194±0.316、6.199±0.184.②替加色羅對各部位平滑肌條作用的半效濃度(pEC<,50>)和pD<,2>均無顯著性差異(F=0.505,P=0.77;F=0.384,P=0.856).③5-HT<,4>受體拮抗劑GR113808使替加色羅對平滑肌條的濃度-反應曲線平行右移.④阿托品、河豚毒素、methysergide、ketanserin和ganisetron(濃度均為1×10<'-6>μM/L)對替加色羅

10、用藥前后的各部位平滑肌條收縮活動均未見顯著性影響.結(jié)論①替加色羅對大鼠結(jié)直腸的平滑肌自發(fā)性收縮活動起抑制作用;②其抑制效應是通過平滑肌上的5-HT<,4>受體介導的.第三部分替加色羅對結(jié)直腸擴張后大鼠自主神經(jīng)活動的影響;目的:探討心率變異性在結(jié)直腸機械刺激對自主神經(jīng)活動影響研究中的應用以及替加色羅對自主神經(jīng)活動的調(diào)節(jié)作用.方法成年雄性大鼠隨機分為藥物組(n=9)和溶媒對照組(n=9),清醒狀態(tài)下記錄心電信號,應用心率變異性的頻域分析法分

11、析結(jié)直腸擴張(CRD,壓力為60mmHg)前后交感神經(jīng)張力(P1/(P1+P2))和迷走神經(jīng)張力(P2/(P1+P2))的變化,以及腹腔注射替加色羅對自主神經(jīng)張力的影響.結(jié)果在溶媒對照組,與基礎狀態(tài)相比,CRD顯著提高P1/(P1+P2)(0.326±0.141 vs0.403±0.142,P<0.05),降低P2/(P1+P2)(0.674±0.141 vs 0.597±0.142,P<0.05);在藥物組,腹腔注射替加色羅后,與基礎