測定某些中草藥活性組分的高效毛細管電泳新方法.pdf

1、毛細管電泳(Capillary electrophoresis，CE)是80年代初建立并迅速發(fā)展起來的一種新型分離技術，具有分離效率高、分析速度快、樣品和試劑消耗少、操作簡便等特點，已廣泛用于化學、生命科學、藥物和環(huán)境等領域，是當前分析化學中發(fā)展迅速的一個學科。本學位論文圍繞毛細管電泳在分離測定中草藥活性組分中的應用進行了深入研究，建立了三種模型測定中草藥活性組分的新方法。 本論文第二部分充分利用了毛細管電泳中反向電壓的特點，研

2、究了反向電壓在不同毛細管電泳模式中的應用，取得了以下幾方面的創(chuàng)新研究： 1.建立了分離測定綠原酸和咖啡酸的非水毛細管電泳新方法，并對山楂果實中的相應成分進行了分析。 2.利用反向電壓及分析物的性質，建立了大體積進樣.非水毛細管電泳測定綠原酸和咖啡酸的新方法，極大的改善了靈敏度。 3.利用反向電壓建立反向遷移毛細管膠束電動色譜(RF-MEKC)法同時分離測定了槲皮素、蘆丁、綠原酸，并將此方法應用于測定魚腥草和山楂果

3、實中的相應成分。 本論文分兩大部分共四章內容。第一部分是有關毛細管電泳理論及應用的進展，第二部分是研究報告： 第一部分：文獻綜述第一章：簡單介紹了CE的原理和特點、CE在藥物研究中的應用以及反向電壓在毛細管電泳中的一些應用。 第二部分：反向電壓在毛細管電泳不同模式中的應用以及應用于草藥中活性成分的分離測定第二章：建立了分離測定山楂果實中活性有機酸的非水毛細管電泳新方法。該方法簡單快速，分離條件為：35mM Tri

4、s-0.7％醋酸的甲醇溶液、分離電壓-25kV。在此最佳條件下，兩種分析物可在10min內實現(xiàn)基線分離。綠原酸和咖啡酸的線性范圍均為20-200μg/ml，連續(xù)運行5次的遷移時間和峰面積的相對標準偏差分別為：2.82％和2.29％(日內)；4.02％和3.14％(日間)。樣品中加入25、50、100μg/mL綠原酸標準溶液的回收率分別為98.7％、98.2％和97.5％；加入25、50、100μg/mL咖啡酸標準溶液的回收率分別為95.

5、6％、102.5％和99.4％。 第三部分：利用大體積樣品堆積法(LVSS)提高了非水毛細管電泳分析山楂果實中的活性有機酸的靈敏度。分離緩沖液為35mM Tris-0.35％醋酸的甲醇溶液，分離電壓為-25kV，重力進樣50s。對Tris濃度、醋酸濃度、分離電壓和進樣時間等因素對分離及富集的影響做了系統(tǒng)研究。綠原酸和咖啡酸的線性范圍均為0.625-20μg/mL，檢測限(S/N=3)分別為0.08μg/ml和0.05μg/mL。

6、該方法已用于生山楂中綠原酸和咖啡酸的含量測定，樣品中加標回收率良好。 第四部分：應用反向電壓建立反向遷移毛細管膠束電動色譜(RF-MEKC)法同時分離測定了魚腥草和山楂果實中的槲皮素、蘆丁和綠原酸。分離條件為：70mM SDS-30mM NaH2PO4、pH2.1，分離電壓-15kV，檢測波長214nm。在此最佳條件下，分析物可在15min內實現(xiàn)基線分離。槲皮素、蘆丁和綠原酸的線性范圍及線性相關系數(shù)分別為25-400μg/mL(