同種異體骨髓單個(gè)核細(xì)胞移植對大鼠急性梗死心肌心室重構(gòu)的影響.pdf

1、本文研究了急性心肌梗死后，骨髓單個(gè)核細(xì)胞梗死區(qū)移植對心室重構(gòu)的影響。急性心肌梗死后必然有心室重構(gòu)的發(fā)生，骨髓干細(xì)胞移植治療心衰探討延緩心室重構(gòu)的方法是目前研究的熱點(diǎn)。有研究證實(shí)，基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)及其特異性組織抑制劑(TIMPs)和轉(zhuǎn)化生長因子-β1對心肌梗死后的心臟基質(zhì)細(xì)胞的增生及膠原的合成降解有重要作用，是反映心室重構(gòu)的有效、可靠的指標(biāo)。因此，本研究通過應(yīng)用骨髓單個(gè)核細(xì)胞梗死心肌移植，選擇反映心室重構(gòu)指標(biāo)的Ⅰ、Ⅲ型膠原比值，

2、及影響心室重構(gòu)的主要調(diào)節(jié)酶(MMPs)和轉(zhuǎn)化生長因子-β1，研究骨髓單個(gè)核細(xì)胞移植對心肌梗死后心室重構(gòu)的抑制作用。 材料與方法Wistar雄性健康大鼠(河南省實(shí)驗(yàn)動物中心提供)32只，體重250～300g，隨機(jī)分為3組，1.假手術(shù)組(8只)，單純開胸但不結(jié)扎冠狀動脈。2.對照組(12只)，大鼠急性心肌梗死后即刻注射等量培養(yǎng)基。3.移植組(12只)，大鼠急性心肌梗死后即刻接受同種異體BM-MNCs移植治療(107BM-MNCs/1

3、00ul/點(diǎn)，分4點(diǎn)注入)。細(xì)胞移植4周后，超聲心動圖評價(jià)左室形態(tài)和左室收縮功能，血流動力學(xué)檢測心率(HR)，左室收縮壓(LVSP)，左室舒張未壓(LVEDP)，左室壓最大上升、下降速率。同時(shí)采用免疫組化S-P(sterpavidinperoxidase)方法對骨髓單個(gè)核細(xì)胞移植后心肌組織中MMP-2、MMP-9、TIMP-2、TGF-β1的含量變化，及對Ⅰ、Ⅲ膠原比值進(jìn)行檢測。統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(X±S)表示，采用SPSS(12.

4、0)統(tǒng)計(jì)軟件包處理，以a=0.05為顯著性檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。 結(jié)果(1)MMP-2、MMP-9、TIMP-2在假手術(shù)組中陽性大鼠心肌細(xì)胞數(shù)百分比分別為15.32±4.8％、17.75±2.0％、18.71±4.05％，對照組中，心肌組織中MMP-2、MMP-9、TIMP-2陽性大鼠心肌細(xì)胞數(shù)百分比分別為42.47±6.7％，37.52±4.3％，41.46±5.53％，移植組中MMP-2、MMP-9、TIMP-2陽性大鼠心肌細(xì)胞數(shù)百分比

5、分別為35.01±6.7％、29.36±4.4％、27.22±3.18％。移植組分別與對照組、假手術(shù)組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。三組大鼠心肌組織中MMP-2、MMP-9、TIMP-2表達(dá)組間差異有顯著性(P＜0.01)。 (2)在假手術(shù)組中TGF-β1陽性心肌細(xì)胞數(shù)百分比為7.82±2.1％，對照組中陽性心肌細(xì)胞數(shù)百分比為6.05±1.9％，移植組中陽性心肌細(xì)胞數(shù)百分比為10.31±2.0％移植組分別與對照組、假

6、手術(shù)組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。三組大鼠心肌組織中TGF-β表達(dá)組間差異有顯著性(P＜0.01)。 (3)Ⅰ/Ⅲ型膠原比值，移植組比值低于對照組，假手術(shù)組，移植組分別與假手術(shù)組、對照組相比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。三組大鼠心肌組織中Ⅰ/Ⅲ型膠原比值組間差異有顯著性(P＜0.01)。 (4)超聲及血液動力學(xué)檢查中，移植組左室射血分?jǐn)?shù)(LVEF)、左室短軸縮短率(LVFS)分別為56.6±2.5

7、％、39.3±2.7％，在對照組中分別為45.8±6.3％、22.8±2.2％，移植組顯著高于對照組。而移植組左室收縮末期內(nèi)徑(LVEDs)和左室舒張末期內(nèi)徑(LVEDd)分別為3.7±1.4mm、6.2±1.6mm，對照組中為6.6±1.6mm、7.8±0.8mm，移植組顯著低于對照組。移植組中左室收縮壓(LVSP)、左室壓最大上升速率(+dp/dtmax)、左室最大下降速率(-dp/dtmax)分別為122.4±8.0mmHg、59

8、87±226mmHg、3880±181mmHg，對照組中分別為118.9±7.2mmHg、4575±197mmHg、3175±217mmHg，移植組顯著高于對照組。假手術(shù)組中分別為129.2±8.6mmHg、7450±169mmHg、5990±210mmHg，移植組高于對照組，低于對照組。三組大鼠心肌組織中LLVEDs、LVEDd、LVEF、LVFS、LVSP、+dp/dtmax、-dp/dtmax組間差異具有顯著性(P＜0.01)。

9、 結(jié)論(1)急性心肌梗死后MMP-2、MMP-9、TIMP-2、TGFβ1活性與心室重構(gòu)、心功能密切相關(guān)，在促進(jìn)心室重構(gòu)、心功能異常中起重要作用。 (2)骨髓單個(gè)核細(xì)胞梗死心肌移植，可以使TGF-β1分泌增加，活性表達(dá)增高，MMPs活性下調(diào)，逐漸恢復(fù)正常MMPs/TIMPs平衡。 (3)骨髓單個(gè)核細(xì)胞梗死心肌移植，可以使心肌膠原基質(zhì)的改變減少，防止膠原纖維的融合，保護(hù)心肌組織基本結(jié)構(gòu)有序排列，最終使左心室內(nèi)徑縮小，