移植于梗死心肌的同種異體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞募集外周血干細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、研究背景:干細(xì)胞移植治療心肌梗死是近年來研究的熱點(diǎn),前期研究發(fā)現(xiàn)移植的干細(xì)胞能在受損心肌組織內(nèi)存活、分化并改善心功能,可能的機(jī)制為移植細(xì)胞通過自分泌或旁分泌作用釋放細(xì)胞因子,促進(jìn)心肌細(xì)胞關(guān)鍵酶或動(dòng)員內(nèi)源性干細(xì)胞的歸巢和分化,干細(xì)胞移植改善心肌細(xì)胞 Na+-K+-ATP酶和 Ca2+-ATP酶的活性已有研究,但能否促進(jìn)外周血干細(xì)胞的歸巢尚未見報(bào)道。目的:通過對(duì)心肌梗死大鼠模型局部注射移植同種異體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,觀察能否改善心功能；在此基

2、礎(chǔ)上靜脈注射同種異體外周血干細(xì)胞,觀察能否進(jìn)一步改善心功能,同時(shí)了解局部注射移植的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞能否募集外周血干細(xì)胞。方法:32只體重為(180g-200g)的SD大鼠,雌雄不限,每組8只,隨機(jī)分為四組:正常對(duì)照組(normal group)、假移植組(faketransplanted group)、骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植組(MSCs group)、骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植+內(nèi)皮祖細(xì)胞移植組(MSCs+EPCs group)；分別于移植前、

3、移植后5周測定大鼠心功能；免疫組化法檢測梗死區(qū)標(biāo)記的干細(xì)胞及骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞的募集情況。采用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果:(1)移植前、移植后5周比較,正常組無明顯差別(P>0.01),假移植組最大左室收縮末壓(LVSP)、左室內(nèi)壓最大(最小)變化速率(LV±dp/dt max)于移植后5周均減小(P<0.01),而左室舒張末壓(INDP)上升(P<0.01),說明假移植組5周后心功能有惡化；MSCs組和

4、MSCs+EPCs組在移植后5周最大左室收縮末壓(LVSP)、左室內(nèi)壓最大(最小)變化速率(LV±dp/dt max)升高,有顯著意義(P<0.01),而左室舒張末壓(LVDP)降低(P<0.01),說明干細(xì)胞移植后心功能有一定程度的恢復(fù)；(2)干細(xì)胞移植后5周,與正常組相比,假移植組最大左室收縮末壓(LVSP)、左室內(nèi)壓最大(最小)變化速率(LV±dp/dt max)均明顯下降(P<0.01),而左室舒張末壓(LVDP)明顯升高(P<

5、0.01)表明心肌梗死后心功能的惡化；MSCs組和MSCs+EPCs組大鼠的LVSP、LV±dp/dt max下降(P<0.01),而LVDP明顯升高(P<0.01),表明干細(xì)胞移植后心功能有一定程度的恢復(fù),但尚未達(dá)到正常；與假移植組相比,MSCs組和MSCs+EPCs組大鼠的 LVSP、LV±dp/dt max均有明顯升高(P<0.01),而LVDP明顯降低(P<0.01)表明細(xì)胞移植后心功能優(yōu)于假移植組；而MSCs組與MSCs+EC

6、Ps組相比,其LVSP、LV±dp/dt max、LVDP改變均不明顯(P>0.01),兩組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,說明其改善心功能效果和骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植組相當(dāng)。(3)免疫熒光染色結(jié)果顯示移植后5周明顯可見梗死區(qū)組織BrdU標(biāo)記的干細(xì)胞,未見DAPI標(biāo)記的干細(xì)胞,表明骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)外周血干細(xì)胞無募集作用。結(jié)論:①大鼠心肌梗死模型的成功建立。②干細(xì)胞移植后較移植前心功能有改善。③MSCs+EPCs組與MSCs組相比,進(jìn)一步改善心功能不明