經(jīng)冠狀動(dòng)脈移植自體骨髓單個(gè)核細(xì)胞治療急性心肌梗死的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、一自體骨髓單個(gè)核細(xì)胞移植于急性心肌梗死區(qū)域的實(shí)驗(yàn)研究 目的：觀察在急性心肌梗死后不同時(shí)間點(diǎn)經(jīng)冠狀動(dòng)脈移植自體骨髓單個(gè)核細(xì)胞于心肌梗死區(qū)域后的定植、生長(zhǎng)和分化特點(diǎn)。 方法：無菌條件下自小型豬髂后上棘抽取骨髓，采用密度梯度離心法獲得自體骨髓單個(gè)核細(xì)胞，用PKH26-GL紅色熒光探針標(biāo)記；結(jié)扎小型豬冠狀動(dòng)脈前降支90分鐘后恢復(fù)血流，即以缺血-再灌注模型制造心肌梗死；在心肌梗死后2小時(shí)和1周分別用微導(dǎo)管經(jīng)冠狀動(dòng)脈進(jìn)行骨髓單個(gè)核細(xì)

2、胞(8-10×107個(gè))移植并分別設(shè)立對(duì)照組(共四組，每組7只)；心梗后6周時(shí)處死動(dòng)物，在梗死區(qū)內(nèi)取材，通過HE染色、PTH染色、熒光顯微鏡、Ⅷ因子和Desmin免疫組化染色及透射電鏡觀察尋找梗死區(qū)內(nèi)存在新生細(xì)胞的證據(jù)，并觀察其生長(zhǎng)和分化特點(diǎn)。 結(jié)果：在心肌梗死后2小時(shí)和1周移植了骨髓單個(gè)核細(xì)胞的梗死區(qū)域內(nèi)，熒光顯微鏡下可見發(fā)出紅色熒光的移植細(xì)胞；HE染色和PTH染色可見幼稚的心肌細(xì)胞；Ⅷ因子和Desmin免疫組化染色提示移植細(xì)

3、胞已向心肌細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞方向分化；透射電鏡下亦可見到幼稚的心肌細(xì)胞，未見細(xì)胞融合現(xiàn)象；HE染色顯示各組均有少數(shù)動(dòng)物的心肌組織發(fā)現(xiàn)輕度炎癥反應(yīng)，未見成骨、鈣化和異常增生等現(xiàn)象。兩移植組的組織學(xué)特點(diǎn)無顯著差異。 結(jié)論：在心肌梗死后2小時(shí)和1周時(shí)經(jīng)冠狀動(dòng)脈移植的骨髓單個(gè)核細(xì)胞均能定植于心肌梗死區(qū)，并可向心肌細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞方向分化。兩個(gè)移植組的組織學(xué)特點(diǎn)無顯著差異。 摘要二經(jīng)冠狀動(dòng)脈移植骨髓單個(gè)核細(xì)胞治療急性心肌梗死的療

4、效研究 目的：觀察在心肌梗死后2小時(shí)和1周時(shí)經(jīng)冠脈移植骨髓單個(gè)核細(xì)胞的療效。 方法：無菌條件下自小型豬髂后上棘抽取骨髓，采用密度梯度離心法獲得自體骨髓單個(gè)核細(xì)胞，用PKH26-GL紅色熒光探針標(biāo)記；結(jié)扎小型豬冠狀動(dòng)脈前降支90分鐘后恢復(fù)血流，即以缺血-再灌注模型制造心肌梗死；在心肌梗死后2小時(shí)和1周時(shí)分別用微導(dǎo)管經(jīng)冠狀動(dòng)脈進(jìn)行骨髓單個(gè)核細(xì)胞(8-10×107個(gè))移植并分別設(shè)立對(duì)照組(共四組，每組7只)。各組在冠脈結(jié)扎前、

5、結(jié)扎后90分鐘(恢復(fù)血流后)和心梗后6周測(cè)定血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)，結(jié)扎前和心梗6周時(shí)超聲心動(dòng)圖測(cè)定左室大小和功能，處死后的組織標(biāo)本以Ⅷ因子免疫組化染色計(jì)算梗死區(qū)小血管密度。 結(jié)果：(1)心肌梗死后2小時(shí)移植組的血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)在冠脈結(jié)扎前、結(jié)扎后90分鐘和心梗后6周和相應(yīng)對(duì)照組相比均無顯著差異(P均＞0.05)。其對(duì)照組心梗后6周時(shí)和結(jié)扎后相比，各項(xiàng)指標(biāo)均無顯著差異(P均＞0.05)。心肌梗死后2小時(shí)移植組心梗6周時(shí)和結(jié)扎后相比，-dp

6、/dtmax的絕對(duì)值和CO顯著升高(-dp/dtmax：1458±304vs800±443mmHg/s，P＜0.05；CO：1.34±0.27vs1.03±0.15L/min，P＜0.05)，余指標(biāo)無顯著差異；心梗后6周的超聲心動(dòng)圖指標(biāo)顯示較對(duì)照組相比，SV和CO顯著升高(SV：22.98±4.00vs15.97±5.83ml，P＜0.05；CO：2.69±0.51vs1.66±0.58L/min，P＜0.05)，余指標(biāo)無顯著差異。兩組

7、間術(shù)后-術(shù)前的差值亦無顯著差異。移植組心肌梗死區(qū)的小血管數(shù)目明顯高于對(duì)照組(41.2±3.7/mm2vs33.6±3.6/mm2，p＜0.05)。 (2)心肌梗死后1周移植組的血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)在冠脈結(jié)扎前、結(jié)扎后90分鐘和相應(yīng)對(duì)照組相比均無顯著差異(P均＞0.05)。其對(duì)照組心梗后6周時(shí)和結(jié)扎后相比，各項(xiàng)指標(biāo)均無顯著差異。心肌梗死后1周移植組心梗6周時(shí)和結(jié)扎后相比，LVEDP、和CO顯著改善(LVEDP：5.8±4.1vs13.3

8、±5.0mmHg，P＜0.05；CO：1.22±0.39vs0.99±0.32L/min,P＜0.05)，余指標(biāo)無顯著差異(其中+dp/dtmax：1900±292vs1520±432mmHg/s，P=0.06，差異接近顯著性)；心梗6周時(shí)，和其對(duì)照組相比，+dp/dt顯著升高(1900±292vs1330±412mmHg/s，P＜0.05)，余指標(biāo)無顯著差異。心梗6周時(shí)的超聲心動(dòng)圖指標(biāo)顯示較對(duì)照組相比，各項(xiàng)指標(biāo)均無顯著差異(P均＞0.

9、05)。心梗后1周移植組術(shù)后-術(shù)前EF的差值明顯高于對(duì)照組(9.24±10.00vs-5.6×±9.64％，P＜0.05)，余指標(biāo)的差值均無顯著差異(P均＞0.05)。心肌梗死后1周移植組梗死區(qū)的小血管數(shù)量明顯高于其對(duì)照組(72.50±16.23/mm2vs38.04±6.41/mm2，p＜0.01)。 (3)兩移植組相比，心肌梗死6周的血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)均無顯著差異(P均＞0.05)。心肌梗死6周時(shí)各項(xiàng)超聲心動(dòng)圖指標(biāo)均無顯著差異(