小尾寒羊DNAJC28基因克隆、結(jié)構(gòu)特征及組織表達(dá)分析.pdf

1、DNAJC28(DnaJhomolog, subfamilyC,member28)是熱激蛋白（Hsp40）家族的一員，是熱激蛋白（HSP70）的分子伴侶，因HSP40都含有特殊的J結(jié)構(gòu)域，所以又稱為DNAJ。根據(jù)分子量大小，可以將熱激蛋白分為6個(gè)亞家族：Hsp100、Hsp90、Hsp70、Hsp60、Hsp40和小熱休克蛋白（如HSP27）。其中Hsp40由于擁有J結(jié)構(gòu)域又被稱為DNAJ。本次研究中，我們克隆鑒定了Hsp40家族的一個(gè)

2、新成員，DnaJ（Hsp40）homolog,subfamilyC,member28，又名DNAJC28。熱激蛋白是動(dòng)物抗應(yīng)激反應(yīng)機(jī)制的重要組成部分，對(duì)于綿羊抗應(yīng)激過程起到很關(guān)鍵的作用。DNAJ最初發(fā)現(xiàn)于大腸埃希氏桿菌，在真核生物中稱為Hsp40，是Hsp70亞類輔助因子，主要調(diào)節(jié)Hsp70酶的活性。DNAJC28基因是 DNAJ家族的一個(gè)基因，對(duì)于調(diào)節(jié)相應(yīng)的Hsp70蛋白生物學(xué)功能起到關(guān)鍵的作用。本研究采用RT-PCR、RACE、熒光

3、定量PCR等方法克隆了DNAJC28基因的全長(zhǎng)序列，并在mRNA水平和蛋白水平進(jìn)行了分析，主要研究結(jié)果如下：
　　（1）本研究采用RACE等方法，以小尾寒羊?yàn)閷?shí)驗(yàn)材料，克隆了小尾寒羊DNAJC28基因的全長(zhǎng)cDNA序列。該基因cDNA全長(zhǎng)為2729bp，3’端1228bp，5’端358bp，cds1143bp，開放閱讀框編碼380個(gè)氨基酸。
　?。?）檢測(cè)到DNAJC28基因在小尾寒羊和杜泊羊中呈現(xiàn)出組織表達(dá)差異性。在相同品

4、種不同組織中表達(dá)差異顯著，檢測(cè)到在主動(dòng)脈、肺臟、腎臟表達(dá)量較高，而在背最長(zhǎng)肌、股二頭肌等組織中表達(dá)量較低。
　　（3）DNAJC28氨基酸系統(tǒng)進(jìn)化同源性分析顯示，該蛋白在哺乳動(dòng)物中高度保守，綿羊該基因與牛、山羊相近而與蝙蝠家鼠等相距較遠(yuǎn)。
　　綜上所述，本研究成功克隆了小尾寒羊DNAJC28基因，對(duì)該基因序列及其編碼的氨基酸序列的結(jié)構(gòu)特征進(jìn)行了預(yù)測(cè)，并比較分析了小尾寒羊和杜泊羊DNAJC28基因mRNA水平和蛋白水平上的組織