基因標志提高原發(fā)性腸道惡性淋巴瘤內鏡活檢診斷率的研究.pdf

1、第一軍醫(yī)大學碩士學位論文基因標志提高原發(fā)性腸道惡性淋巴瘤內鏡活檢診斷率的研究姓名：陳利申請學位級別：碩士專業(yè)：消化內科學指導教師：郭文20060512中文摘要一般來講，B 細胞性淋巴瘤陽性表達C D 2 0 ，免疫球蛋白重鏈是其很有用的標記物，絕大多數B 細胞性淋巴瘤都有I gH 基因重排；T 細胞性淋巴瘤陽性表達C D 4 5 R 0 、C D 3 ，T 細胞受體是其有用的標記物，幾乎所有的T 細胞性淋巴瘤都有T C R 基因重排，而

2、且近年的研究發(fā)現，抗凋亡蛋白b c l 一2 、s u r v i v i n 在腫瘤組織中廣泛增強，因此可以檢測腸道淋巴瘤中的抗凋亡蛋白、免疫表型及基因克隆性重排等基因標志來提高腸道淋巴瘤的內鏡活檢率。本課題研究的目的在于篩選高效、方便、經濟的對腸道淋巴瘤更進一步診斷與鑒別診斷的檢測指標，以提高內鏡活檢診斷率，并擬定該病內鏡活檢的程序化診斷檢測模式。方法：1 ．通過對照手術病理回顧性總結腸道淋巴瘤內鏡形態(tài)特征和超聲內鏡聲像圖，H E

3、染色常規(guī)病理學觀察和免疫組織化學染色及其活檢陽性率。2 ．通過免疫組織化學染色檢測2 4 例腸道淋巴瘤和2 0 例克羅恩病活檢標本中C D 3 、C D 2 0 、C D 4 5 R O 、B c l ．2 、S u r v i v i n 的表達，隨意計數1 0 0 0 個淋巴細胞中的陽性細胞，計算其他陽性表達率。采用S P S S l l ．5 軟件利用O n eW a y A N O V A行L S D 分析組間差異，以P <

4、; 0 ．0 5 為差異顯著性意義。3 ．提取2 4 例腸道淋巴瘤和2 0 例克羅恩病活檢標本( 石蠟標本) 的基因組D N A ，根據I g H 基因序列和T C R Y 受體基因序列設計引物，然后用P C R 技術分別擴增I g H 的V —D —J 區(qū)( 9 0 —1 2 b p ) 和T C R Y 的V —J 區(qū)( 2 3 0 —2 4 5 b p ) ，采用銀染S S C P 技術進行檢測，并用B 、T 淋巴瘤細胞株作為陽性

5、對照，如出現與陽性標本相一致的主條帶認為有克隆性重排。4 ．利用S P S S l l ．5 軟件對前面實驗獲得的7 個指標( C D 3 、C D 2 0 、C 0 4 5 R 0 、B c l 一2 、S u r v i v i n 、I g H 、T C R ) 進行逐步判別分析。結果：1 ．腸道淋巴瘤在內鏡下大體形態(tài)表現為潰瘍型1 8 例( 7 5 ％) ，其次為息肉4例型( 1 6 ．7 ％) 和彌漫型2 例( 8 ．3 ％)