MAPK和ROS在慢性飲酒大鼠胃黏膜細胞增殖中作用的研究.pdf

1、以往的研究證實，慢性飲酒可使胃黏膜細胞更新加快，引起胃黏膜適應性細胞保護作用，但其機制尚不清楚。本研究在以往建立的慢性飲酒動物模型的基礎上，探討長期攝入低濃度酒精和胃黏膜細胞增殖之間的相關性以及與此相關的分子事件，尤其關注活性氧(reactiveoxygenspecies，ROS)及細胞外信號調(diào)節(jié)激酶(extracellularsignal-regulatedkinases，ERKs)、大分子MAPK(bigmitogen-activa

2、tedproteinkinases-1，BMKl)和c-Jun氨基末端激酶(c-JunN-terminalkinase，JNK)信號通路是否參與了慢性飲酒引起的大鼠胃黏膜細胞增殖過程。將成年雄性SD大鼠隨機分為四組，第一組(對照組)：飲用清水；第二組(酒精組)：飲用6﹪(v/v)酒精水溶液；第三組(槲皮素組)：飲用清水，槲皮素(100mg/kg)每12h灌胃一次；第四組(酒精+槲皮素組)：飲用6﹪酒精水溶液，同時每隔12h給予槲皮素(1

3、00mg/kg)灌胃一次，均處理7天。在處理7天末，取大鼠胃黏膜，用流式細胞術、增殖細胞核抗原(PCNA)的免疫組化染色以及PCNA和細胞周期蛋白D1(CyclinD1)的免疫印跡分析觀察胃黏膜的細胞增殖情況，同時用免疫印跡法檢測胃組織中ERKs、BMK1和JNK激酶的下游分子c-Jun的表達及活性的改變，采用免疫熒光雙重染色方法對胃黏膜組織石蠟切片PCNA和磷酸化的BMK1(p-BMK1)蛋白進行定位。結果表明：與對照組相比，飲用低濃

4、度酒精后細胞增殖明顯增強；酒精組PCNA、p-BMK1雙陽性細胞主要定位于胃底腺頸部；BMK1的表達、激活以及c-Jun的活性與酒精誘導的胃黏膜干細胞增殖呈正相關，ERK1/2的表達、激活與增殖無關；但飲酒同時給予自由基清除劑……槲皮素灌胃抑制了酒精誘導的BMK1表達與激活以及c-Jun的活化，同時反轉了慢性飲酒引起的細胞增殖增強的作用。這些結果說明慢性飲用低濃度酒精刺激了胃黏膜底腺干細胞的增殖，可能與酒精引起ROS增多有關，同時本研究