功能納米材料抑制癌細(xì)胞生長和促進(jìn)癌細(xì)胞凋亡的研究.pdf

1、納米材料對本世紀(jì)一系列高新技術(shù)的產(chǎn)生與發(fā)展都具有重要的影響，在藥物研究領(lǐng)域的熱點問題亦是如此——利用納米材料特殊的表面效應(yīng)、量子尺寸效應(yīng)等特點，在藥物輸送作用中將實現(xiàn)器官靶向、高效輸送和低毒等方面的重大突破。因此，納米藥物的研究已經(jīng)成為現(xiàn)代醫(yī)學(xué)發(fā)展的重要方向之一，也是藥物創(chuàng)新的一個重要領(lǐng)域。惡性腫瘤(癌癥)是僅次于心腦血管疾病，威脅人類健康的疾病殺手之一，至今尚未發(fā)現(xiàn)有特效的治療方法。在本論文的工作中，我們研究和揭示了功能Fe3O4納米

2、顆粒，石墨烯納米復(fù)合物和量子點納米顆粒等在抑制體外癌細(xì)胞生長及促進(jìn)癌細(xì)胞凋亡的協(xié)同作用，并對其作用機(jī)理進(jìn)行了討論。同時，構(gòu)建了腫瘤裸鼠模型，尾靜脈給藥對抑制裸鼠腫瘤生長和促凋亡機(jī)制進(jìn)行了研究和探討。
　　 本論文的主要研究內(nèi)容如下:
　　 1)納米復(fù)合物的合成及其表征
　　 本論文中我們設(shè)計合成了功能Fe3O4納米顆粒及兩種載藥磁性納米顆粒;CdTe量子點納米顆粒;同時合成金納米顆粒并自組裝獲得石墨烯—金納米復(fù)合

3、物;設(shè)計了納米級二茂鐵—碳硼烷衍生物。
　　 2)腫瘤細(xì)胞，腫瘤裸鼠模型的建立
　　 通過細(xì)胞試驗研究了相關(guān)納米復(fù)合物與敏感白血病K562細(xì)胞和耐藥白血病KA細(xì)胞，人類非小細(xì)胞肺癌HCC827細(xì)胞，以及人肝癌耐藥HepG2細(xì)胞的相互作用;并且建立了相關(guān)腫瘤裸鼠模型，研究了動物抗癌活性實驗。
　　 3)納米復(fù)合物促癌細(xì)胞凋亡
　　 首先利用MTT的方法研究相關(guān)納米復(fù)合物對癌細(xì)胞的殺傷作用，以及顯著抑制癌細(xì)胞

4、增殖的協(xié)同作用。納米復(fù)合物作用癌細(xì)胞后，進(jìn)一步進(jìn)行了AO/EB熒光染色，并在熒光顯微鏡下觀察凋亡了細(xì)胞形態(tài)，采用流式細(xì)胞儀計算了癌細(xì)胞凋亡率。經(jīng)納米復(fù)合物處理過的癌細(xì)胞凋亡后的DNA斷裂形成長度相差約為200bp的DNA梯度片段，經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳顯示為階梯狀凋亡DNAfragmentation。同時，我們利用Western印跡方法進(jìn)一步研究了納米復(fù)合物對癌細(xì)胞的促凋亡作用的分子機(jī)理，結(jié)果表明納米復(fù)合物通過活化細(xì)胞凋亡的關(guān)鍵蛋白Caspa

5、se8，9等上游凋亡蛋白，活化了細(xì)胞凋亡執(zhí)行蛋白Caspase7，3，而活化的Caspase7，3接著活化了PARP，導(dǎo)致DNA修復(fù)的抑制，并啟動DNA的降解。與此同時，相關(guān)納米復(fù)合物顯著降低了癌細(xì)胞緊密連接蛋白和P-糖蛋白的表達(dá)。在此基礎(chǔ)上，我們構(gòu)建了腫瘤裸鼠模型，并且通過尾靜脈注射協(xié)同藥物來抑制裸鼠的腫瘤生長，并通過對腫瘤組織切片DNA缺口末端標(biāo)記(TUNEL)檢測。
　　 研究結(jié)果表明，相關(guān)納米復(fù)合物如磁性Fe3O4納米顆