應(yīng)用半巢式RT-PCR和診斷芯片技術(shù)檢測(cè)和區(qū)分病毒71和柯薩奇病毒A16.pdf

1、手足口病是兒童常見的發(fā)熱出疹性良性疾病，由多種人類腸病毒感染所引起，其中以腸道病毒71型(EV71)、柯薩奇病毒A組16型(CAV16)最為常見。腸道病毒71和柯薩奇病毒A組16型基因結(jié)構(gòu)極其相似，引起的臨床表現(xiàn)很難區(qū)分，但是腸道病毒71感染會(huì)發(fā)展為嚴(yán)重的中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病，甚至死亡。
　　 檢測(cè)和區(qū)分腸病毒血清型一般依賴于傳統(tǒng)的免疫學(xué)方法，但由于腸病毒表面蛋白抗體有限，導(dǎo)致很多臨床分離株不能分型。而基因芯片技術(shù)可以高度精確地檢測(cè)

2、多個(gè)血清型。本實(shí)驗(yàn)聯(lián)合半巢式逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)和芯片技術(shù)同時(shí)檢測(cè)和分型腸道病毒71和柯薩奇病毒A組16型，設(shè)計(jì)和合成的引物和寡核苷酸探針位于VP1基因區(qū)域。實(shí)驗(yàn)收集399份手足口病人或者可能是手足口病人的糞便樣本，并應(yīng)用RT-PCR對(duì)其進(jìn)行初步篩選，結(jié)果顯示139份臨床樣本為腸病毒陽性；然后應(yīng)用芯片技術(shù)對(duì)399份臨床樣本進(jìn)行檢測(cè)，將其芯片結(jié)果與DNA測(cè)序結(jié)果進(jìn)行比較，結(jié)果顯示芯片腸道病毒71的靈敏性和特異性分別為100