急性心肌梗死晚期再灌注對(duì)心肌細(xì)胞凋亡和Fas-FasL基因的影響及其可能的氧化應(yīng)激機(jī)制.pdf

1、目的：再灌注治療是目前治療急性心肌梗死(acutemyocardialinfarctionAMI)的有效方法之一。業(yè)已證實(shí)，心肌梗死后早期恢復(fù)血液供應(yīng)，能減少梗死面積，同時(shí)也可能使心肌細(xì)胞的損傷進(jìn)一步加重即缺血-再灌注損傷(ischemiareperfusioninjuryIRI)。目前有關(guān)AMI后晚期使梗死相關(guān)動(dòng)脈再通是否有利于改善AMI的預(yù)后存在爭(zhēng)論，尤其是晚期再灌注是否也存在再灌注損傷的問題文獻(xiàn)尚未見報(bào)道。本研究通過研究犬的AMI

2、晚期再灌注模型來探討晚期再灌注對(duì)梗死邊緣區(qū)心肌細(xì)胞凋亡基因Fas/FasL的影響及其與氧化應(yīng)激反應(yīng)之間的關(guān)系。 方法：30條健康成年雜種犬隨機(jī)平均分為五組：對(duì)照組、持續(xù)缺血組、晚期再灌注組、晚期再灌注預(yù)加美托洛爾組、晚期再灌注預(yù)加卡維地洛組。所有犬行靜脈麻醉、心電監(jiān)護(hù)、氣管插管接呼吸機(jī)后常規(guī)消毒，于左側(cè)第4、5肋間進(jìn)胸，行心包吊床。找到冠狀動(dòng)脈左前降支，于前降支中段(距離起點(diǎn)0.5cm處)穿過絲線。對(duì)照組只穿線不結(jié)扎；持續(xù)缺血組

3、開胸后6h持續(xù)結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈6h；晚期再灌注組持續(xù)結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈6h，再灌注6h；晚期再灌注預(yù)加美托洛爾組在術(shù)前灌服美托洛爾(1mg/kg/d)共七天后，結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈6h，再灌注6h；晚期再灌注預(yù)加卡維地洛組在術(shù)前灌服卡維地洛(1mg/kg/d)共七天后，結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈6h，再灌注6h。各組經(jīng)上述處理后處死，取出心臟，剪取心肌梗死邊緣區(qū)心肌組織。用末端脫氧核糖核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT)介導(dǎo)的帶熒光的dUTP缺口末端標(biāo)記(TdT-media

4、teddUTPnickendlabeling,TUNEL)法測(cè)心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)(apoptoticindexAI)；用鏈霉親和素-生物素-過氧化酶復(fù)合物(streptavidin-biotincomplexSABC)法測(cè)Fas和FasL基因表達(dá)；用黃嘌呤氧化法測(cè)超氧化物歧化酶(superoxidedismutaseSOD)活性；用比色法測(cè)谷胱甘肽還原酶(glutathioneReducaseGR)活性；用巴比妥酸法測(cè)丙二醛(malond

5、ialdehydeMDA)含量。 結(jié)果：持續(xù)缺血組和晚期再灌注組的梗死邊緣區(qū)心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)以及Fas和FasL基因表達(dá)明顯高于對(duì)照組(分別為p＜0.05,P＜0.01)，并且晚期再灌注組比持續(xù)缺血組增加更明顯，兩組相比差異有顯著性(p＜0.05)。與對(duì)照組相比，持續(xù)缺血組和晚期再灌注組梗死邊緣區(qū)心肌細(xì)胞的SOD和GR活性均明顯降低(分別為p＜0.05，p＜0.01)，而MDA含量均明顯升高(分別為p＜0.05，p＜0.01)，

6、并且兩組之間的SOD和GR活性以及MDA含量也存在明顯差異(p均＜0.05)。與晚期再灌注組相比，晚期再灌注預(yù)加美托洛爾組的心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)以及Fas和FasL基因表達(dá)明顯下降，差異有顯著性(p＜0.05)，并且晚期再灌注預(yù)加卡維地洛比晚期再灌注預(yù)加美托洛爾下降更明顯，兩組相比差異有顯著性(p＜0.05)。與晚期再灌注組相比，晚期再灌注預(yù)加美托洛爾組的心肌細(xì)胞SOD、GR活性以及MDA含量無明顯改變(p＞0.05)，而晚期再灌注預(yù)加卡維