納豆菌胞內(nèi)抗氧化活性物質(zhì)的分離純化及其抗腫瘤活性的研究.pdf

1、在正常生命過程中自由基是維持生命所必需的，但自由基也是生物大分子、細胞和生物組織的危險殺手。目前研究結果揭示的證據(jù)表明，自由基幾乎和人類常見的幾種主要疾病都有一定的關系。其中自由基參與癌變的機理，也己為人們所公認。在癌癥形成三個階段中，推測都有高度活潑性的自由基參與。因此從抗氧化、清除自由基的角度抑制腫瘤的發(fā)生和發(fā)展越來越受到重視。
　　 納豆菌及其代謝產(chǎn)物具有多種生理功能，包括溶血栓、降血壓、抗氧化、抗致病菌等。本文以納豆菌為

2、研究對象，圍繞其細胞內(nèi)的抗氧化活性物質(zhì)的分離純化及其抗腫瘤活性進行研究。
　　 首先對納豆菌菌體進行超聲破碎，收集上清，并利用大孔樹脂、凝膠層析等手段分離到具有顯著抗氧化活性的小分子肽復合物，并通過薄層層析、高效液相色譜確定其主要組成為Trp、Tyr、Val、Pro和Lys。
　　 在此基礎上，對其抗腫瘤活性進行研究。通過比較造模劑二甲基苯蒽(DMBA)和甲基亞硝基脲(MNU)，確定以甲基亞硝基脲(MNU)誘導乳腺癌大鼠

3、，作為體內(nèi)實驗的乳腺癌動物模型。進一步通過給藥組和對照組的比較，測定抗氧化小肽復合物的體內(nèi)抗腫瘤作用與毒副作用程度。結果顯示該小肽復合物具有一定抑制腫瘤的作用，并對肝臟、腎臟的毒性顯著低于抗腫瘤藥物順鉑(cisplatin，DDP)，并且平均體重和生存率也有一定程度的提高。通過實時定量PCRΔΔCt法對給藥組和對照組乳腺癌動物模型的超氧化物歧化酶(SuperoxideDismutase，SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(Glutathion

4、e Peroxidase，GPx)基因的表達水平進行測定，發(fā)現(xiàn)SOD基因、GPx基因的表達水平都有很大程度的提高。
　　 本論文從納豆菌細胞內(nèi)分離到具有顯著抗氧化活性的小分子肽復合物，并發(fā)現(xiàn)該小肽復合物在對肝、腎毒副作用較低的情況下，具有一定抑制腫瘤的作用。且該小肽復合物能顯著提高實驗動物的抗氧化酶基因表達水平，在發(fā)揮抑制腫瘤作用的同時，提高機體抗氧化能力、緩解抗腫瘤藥物順鉑的毒副作用，為納豆菌代謝產(chǎn)物的應用奠定了堅實的理論基礎