酸棗仁抗氧化活性物質的提取分離及其活性的研究.pdf

1、酸棗仁是我國常見的中藥材之一,其有效成分具有較高的抗氧化活性,可以開發(fā)成為具有抗氧化作用的藥物或保健品。本文系統(tǒng)研究酸棗仁提取物有效成分的抗氧化活性,不但以活性追蹤法找到酸棗仁中抗氧化活性最好的組分并進行譜圖鑒定,還進一步研究各活性組分抗氧化活性的協(xié)同作用,為以后以酸棗仁為原料生產(chǎn)抗氧化、抗衰老功能性食品藥品提供參考與依據(jù)。
　　 本實驗研究了不同方法分離得到的酸棗仁油的抗氧化活性,得出酸棗仁油中含有大量不飽和脂肪酸,這一含量決

2、定了其抗氧化活性的強弱。實驗證明,超臨界CO2萃取法與微波輔助萃取法得到的酸棗仁油的抗氧化活性遠遠優(yōu)于索氏萃取法得到的酸棗仁油,并且與人工合成抗氧化劑BHT活性相當。
　　 建立了酸棗仁中抗氧化活性物質的提取工藝路線。通過單因素法、正交實驗法、響應面設計法,以清除DPPH自由基的能力、清除羥自由基的能力、總抗氧化能力、總還原能力為檢測指標,最終確定最優(yōu)提取路線。該提取條件是:石油醚脫脂處理后的酸棗仁粉末(40目)在59.1％的乙

3、醇溶液中(1:10)進行回流提取4.5小時(76.5℃)提取一次,收集提取液,減壓濃縮,得粗品。該條件下得到的酸棗仁粗品抗氧化活性最好。
　　 確定了有機溶劑萃取后乙酸乙酯相為活性最好的部分,并研究了聚酰胺樹脂分離純化酸棗仁乙酸乙酯萃取相的條件。實驗證明,分離條件為上樣量5mg；洗脫體系為0-27min內,30％甲醇等度洗脫；27—37min內,30％-80％甲醇線性梯度洗脫；37-75min內,80％甲醇等度洗脫；流速5mL／

4、min時,分離出分離物B為抗氧化活性最好的部分。
　　 研究了C18填料中低壓制備分離聚酰胺分離物B的條件。實驗證明,分離條件為洗脫體系為0-60min內由甲醇:水=40:60線性變化為甲醇:水=50:50；流速為5mL／min時,分離出分離物B2為酸棗仁中抗氧化活性最好的組分。
　　 通過質譜(MS)和核磁共振(NMR)鑒定了分離出的活性物質的分子量和結構,鑒定出聚酰胺分離物A為酸李堿,C18填料分離物B1為斯皮諾素,

5、C18填料分離物B2為6阿魏酰斯皮諾素。
　　 研究了提取分離純化過程中不同操作單元所得物質的抗氧化活性比較,發(fā)現(xiàn)隨著各操作單元的逐漸增加分離物質的抗氧化活性也逐步增加,最后單品6'''阿魏酰斯皮諾素活性最好。
　　 研究了酸棗仁提取物:酸李堿、斯皮諾素與6阿魏酰斯皮諾素抗氧化活性之間的相互關系。實驗發(fā)現(xiàn)不同配比混合后,酸李堿、斯皮諾素、6阿魏酰斯皮諾素在清除DPPH自由基的反應中呈現(xiàn)拮抗作用,在總抗氧化能力的反應中為拮