酸棗仁抗氧化活性物質(zhì)的提取分離及其活性的研究.pdf

1、酸棗仁是我國(guó)常見(jiàn)的中藥材之一,其有效成分具有較高的抗氧化活性,可以開(kāi)發(fā)成為具有抗氧化作用的藥物或保健品。本文系統(tǒng)研究酸棗仁提取物有效成分的抗氧化活性,不但以活性追蹤法找到酸棗仁中抗氧化活性最好的組分并進(jìn)行譜圖鑒定,還進(jìn)一步研究各活性組分抗氧化活性的協(xié)同作用,為以后以酸棗仁為原料生產(chǎn)抗氧化、抗衰老功能性食品藥品提供參考與依據(jù)。
　　 本實(shí)驗(yàn)研究了不同方法分離得到的酸棗仁油的抗氧化活性,得出酸棗仁油中含有大量不飽和脂肪酸,這一含量決

2、定了其抗氧化活性的強(qiáng)弱。實(shí)驗(yàn)證明,超臨界CO2萃取法與微波輔助萃取法得到的酸棗仁油的抗氧化活性遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于索氏萃取法得到的酸棗仁油,并且與人工合成抗氧化劑BHT活性相當(dāng)。
　　 建立了酸棗仁中抗氧化活性物質(zhì)的提取工藝路線。通過(guò)單因素法、正交實(shí)驗(yàn)法、響應(yīng)面設(shè)計(jì)法,以清除DPPH自由基的能力、清除羥自由基的能力、總抗氧化能力、總還原能力為檢測(cè)指標(biāo),最終確定最優(yōu)提取路線。該提取條件是:石油醚脫脂處理后的酸棗仁粉末(40目)在59.1％的乙

3、醇溶液中(1:10)進(jìn)行回流提取4.5小時(shí)(76.5℃)提取一次,收集提取液,減壓濃縮,得粗品。該條件下得到的酸棗仁粗品抗氧化活性最好。
　　 確定了有機(jī)溶劑萃取后乙酸乙酯相為活性最好的部分,并研究了聚酰胺樹(shù)脂分離純化酸棗仁乙酸乙酯萃取相的條件。實(shí)驗(yàn)證明,分離條件為上樣量5mg；洗脫體系為0-27min內(nèi),30％甲醇等度洗脫；27—37min內(nèi),30％-80％甲醇線性梯度洗脫；37-75min內(nèi),80％甲醇等度洗脫；流速5mL／

4、min時(shí),分離出分離物B為抗氧化活性最好的部分。
　　 研究了C18填料中低壓制備分離聚酰胺分離物B的條件。實(shí)驗(yàn)證明,分離條件為洗脫體系為0-60min內(nèi)由甲醇:水=40:60線性變化為甲醇:水=50:50；流速為5mL／min時(shí),分離出分離物B2為酸棗仁中抗氧化活性最好的組分。
　　 通過(guò)質(zhì)譜(MS)和核磁共振(NMR)鑒定了分離出的活性物質(zhì)的分子量和結(jié)構(gòu),鑒定出聚酰胺分離物A為酸李堿,C18填料分離物B1為斯皮諾素,

5、C18填料分離物B2為6阿魏酰斯皮諾素。
　　 研究了提取分離純化過(guò)程中不同操作單元所得物質(zhì)的抗氧化活性比較,發(fā)現(xiàn)隨著各操作單元的逐漸增加分離物質(zhì)的抗氧化活性也逐步增加,最后單品6'''阿魏酰斯皮諾素活性最好。
　　 研究了酸棗仁提取物:酸李堿、斯皮諾素與6阿魏酰斯皮諾素抗氧化活性之間的相互關(guān)系。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)不同配比混合后,酸李堿、斯皮諾素、6阿魏酰斯皮諾素在清除DPPH自由基的反應(yīng)中呈現(xiàn)拮抗作用,在總抗氧化能力的反應(yīng)中為拮