若參堿磺酸鈉與苦參堿藥動(dòng)學(xué)比較研究.pdf

1、苦參堿是一種重要的生物堿，來源于苦參Sophora flavescens Ait，具有多種重要的藥理活性，比如解熱、降溫、鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜、抗心律失常、減輕心肌損傷、保護(hù)心肌缺血、抗腫瘤、防止肝纖維化及抗乙型肝炎病毒等。由于其毒性較大，該化合物具有良好的應(yīng)用價(jià)值和應(yīng)用前景大打折扣。為了改善其毒性，降低其不良反應(yīng)，我們著手對其進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾和改造?？鄥A磺酸鈉是苦參堿的一種衍生物。本課題首先著重考察磺酸鈉結(jié)構(gòu)修飾對苦參堿母體的藥動(dòng)學(xué)的影響。通過比

2、較苦參堿磺酸鈉與苦參堿之間的藥動(dòng)學(xué)和生物利用度的差異，闡明磺酸鈉結(jié)構(gòu)修飾對苦參堿母體藥動(dòng)學(xué)影響，從而為進(jìn)一步開發(fā)提供試驗(yàn)參考。
　　 本試驗(yàn)首先建立了樣品處理簡單，專屬性強(qiáng)，靈敏度高，分析時(shí)間短LC-MS測定大鼠血漿中苦參堿濃度和LC-MS/MS測定大鼠血漿中苦參堿磺酸鈉的方法。大鼠血漿中苦參堿在0.01-5μg/ml濃度范圍內(nèi)，樣品峰面積比與濃度呈良好線性關(guān)系，R2>0.99。最低檢測濃度為0.01μg/ml，絕對回收率為99

3、.00％～102.0％，批內(nèi)及批間精密度分別為1.51％～4.46％和3.30％～6.61％。大鼠血漿中苦參堿磺酸鈉在5-5000 ng/ml濃度范圍內(nèi)，樣品峰面積比與濃度呈良好線性關(guān)系，R2>0.99。最低檢測濃度為5 ng/ml，絕對回收率為96.74％～101.6％，批內(nèi)及批間精密度分別為2.53％～4.62％和2.84％～6.02％。經(jīng)過方法學(xué)驗(yàn)證，均符合生物樣品測定分析的要求。
　　 本試驗(yàn)研究了SD大鼠尾靜脈注射、肌

4、肉注射和灌胃給予苦參堿和苦參堿磺酸鈉后的藥動(dòng)學(xué)過程。三個(gè)劑量(2.5、5和20mg&g)靜脈注射給予大鼠苦參堿磺酸鈉后，AUC0-t分別為189.0±9.7、400.3±33.2和1615±76.9mg/L*min，AUC0-∞分別為190.5±9.8、403.2±33.8和1633±78.7mg/L*min；MRT0-t分別為37.33±1.93、30.55±0.5和35.99±0.48min，MRT0-∞分別為40.97±2.79、

5、34.05±2.82和41.29±1.37 min；t1/2分別為77.8±19.9、91.3±37.5和99.7±5.9min；CL分別為0.013±0.001、0.013±0.001和0.012±0.001L/min/kg；Vz分別為1.47±0.35、1.63±0.67和1.76±0.10L/kg；Cmax分別為6.51±0.49、17.3±0.96和70.48±3.43mg/L。三個(gè)劑量(50、100和200mg/kg)灌胃和單

6、劑量(5mg/kg)肌肉注射給予大鼠苦參堿磺酸鈉后，AUC0-t分別為184.2±8.1、319.0±2.9、611.9±52.4和363.6±10.6mg/L*min，AUC0-∞分別為186.4±8.4、323.5±29.4、620.3±52.2和366.1±10.6mg/L*min；MRT0-t分別為122.4±2.5、130.0±1.4、125.1±1.6和82.3±0.7min，MRT0-∞分別為130.2±3.4、140.2

7、±5.8、134.0±4.7和86.76±1.19 min；t1/2分別為109.0±14.7、112.5±26.6、127.0±28.1和112.5±26.6min；CL分別為0.269±0.012、0.312±0.029、0.325±0.028和0.014±0.001L，/min/kg；Vz分別為42.21±0.35、50.86±14.49、59.56±15.50和1.98±0.09L/kg；Cmax分別為1.51±0.07、2.0

8、9±0.18、4.14±0.29和5.29±0.15mg/L；Tmax分別為75±0、75±0、75±0和30±0 min。大鼠注射給予苦參堿磺酸鈉后藥.時(shí)曲線下面積AUC與劑量呈線性關(guān)系(R2>0.9995)，說明苦參堿磺酸鈉在大鼠體內(nèi)靜脈注射劑量2.5-20mg/kg范圍內(nèi)、灌胃給藥在50-200mg/kg的劑量范圍內(nèi)均符合線性藥動(dòng)學(xué)特征。
　　 單劑量靜脈注射(5 mg/kg)、肌肉注射(5 mg/kg)和灌胃(50mg/

9、kg)給予大鼠苦參堿后，AUC0-t分別為176.5±32.1、157.9±8.4和820.6±30.2mg/L*min，AUC0-oo分別為179.1±32.0、158.8±8.0和1055.0±81.0mg/L*min；MRT0-t分別為96.5±12.9、117.9±5.1和228.2±28.4min，MRT0-∞分別為106.7±20.9、121.7±4.1和401.8±71.3 min；t1/2分別為107.2±40.1、80

10、.0±12.4和279.3±69.7min；CL分別為0.013±0.001、0.013±0.001和0.012±0.001L/min/kg；Vz分別為0.029±0.005、3.66±0.77和18.90±3.28L/kg；Cmax分別為2.28±0.26、1.12±0.07和2.97±0.49mg/L。其中肌肉注射和灌胃給藥后的Tmax分別為42.5±19.9和15±0 min。
　　 本試驗(yàn)研究表明，大鼠體內(nèi)肌肉注射給予苦

11、參堿磺酸鈉的絕對生物利用度為90.84％±2.64％；大鼠體內(nèi)肌肉注射給予苦參堿的絕對生物利用度為94.88％±4.16％；大鼠體內(nèi)灌胃給予苦參堿磺酸鈉的絕對生物利用度為4.6％±0.20％；大鼠體內(nèi)灌胃給予苦參堿的絕對生物利用度為47.85％±3.01％。從給藥方式上比較，苦參堿和苦參堿磺酸鈉的肌肉注射生物利用度都明顯高于灌胃?？鄥A磺酸鈉與苦參堿肌肉注射情況下，兩者生物利用度差別不大；而兩者在灌胃情況下生物利用度差別較大，苦參堿磺酸

12、鈉比苦參堿生物利用度低大約10倍。
　　 選擇相同給藥劑量的苦參堿和苦參堿磺酸鈉在大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)進(jìn)行比較，在靜脈注射給藥方式情況下，磺酸鈉結(jié)構(gòu)修飾后的苦參堿母體在大鼠體內(nèi)的半衰期t1/2、清除率CL、表觀分布容積V和平均駐留時(shí)間MRT均減??；而在相同劑量情況下血藥濃度曲線下面積AUC則呈現(xiàn)增加現(xiàn)象；在肌肉注射給藥方式下，磺酸鈉結(jié)構(gòu)修飾對苦參堿母體的血藥濃度曲線下面積AUC、Cmax和t1/2均產(chǎn)生增加現(xiàn)象，對清除率CL、表觀分