苦參堿結(jié)腸緩釋微丸的制備及其在比格犬體內(nèi)的藥動學(xué)研究.pdf

1、目的：
　　基于本項目組專利CN101700227A，采用Eudragit S100腸溶包衣材料制備苦參堿結(jié)腸緩釋微丸；通過LC-MS/MS技術(shù)建立生物樣本中苦參堿濃度的測定方法；研究苦參堿結(jié)腸緩釋微丸在健康比格犬體內(nèi)的藥動學(xué)。
　　方法：
　　1.苦參堿結(jié)腸緩釋微丸的制備：采用擠出滾圓法制備苦參堿丸芯，以載藥丸芯的成球性（表面形態(tài)、圓整度、堆密度和收率）作為指標(biāo)，對載藥丸芯的處方進(jìn)行篩選。采用流化床進(jìn)行包衣，以微丸的

2、釋放度為指標(biāo)，對隔離衣及包衣層增重量進(jìn)行單因素考察，確定隔離衣及包衣液的處方。建立紫外分光光度法測定苦參堿結(jié)腸緩釋微丸中苦參堿的含量。
　　2.苦參堿結(jié)腸緩釋微丸在健康比格犬體內(nèi)的藥動學(xué)研究：建立 LC-MS/MS法測定比格犬血漿中苦參堿的濃度，血漿樣品加入內(nèi)標(biāo)（地西泮），經(jīng)乙腈沉淀蛋白后，高速離心，取上清液進(jìn)樣分析。采用Shim-pack XR-C8柱（2.0 mm×100 mm，2.2mm）；流動相為10 mmol·L-1醋酸

3、銨水溶液（乙酸調(diào)節(jié)pH至3.5）—乙腈；梯度洗脫，流速為0.3 mL·min-1；柱溫40℃；進(jìn)樣10mL。質(zhì)譜采用ESI離子源，正離子多反應(yīng)監(jiān)測模式進(jìn)行檢測，苦參堿和內(nèi)標(biāo)地西泮的選擇性檢測離子對分別為m/z249.3→148.2和m/z285.2→193.2。以苦參堿普通膠囊為參比制劑，對苦參堿結(jié)腸緩釋微丸在比格犬體內(nèi)的藥動學(xué)進(jìn)行研究，測定給藥后不同時間的血藥濃度，采用DAS2.0軟件計算藥動學(xué)參數(shù)。
　　結(jié)果：
　　1.

4、苦參堿結(jié)腸緩釋微丸的制備：經(jīng)實驗確定微丸的最優(yōu)處方，苦參堿25％、MCC62%、十八醇8%、殼聚糖5%，適量35%乙醇為潤濕劑，增重8%的十八醇為隔離衣，增重8%的Eudragit S100為外包衣。在200.7 nm測定苦參堿的濃度，苦參堿濃度范圍在8～40 mg·L-1時線性關(guān)系良好，方法回收率為92.68%，重復(fù)性RSD為2.32%，符合藥物的含量測定要求。經(jīng)含量測定，所得微丸的平均包封率為89.98%，平均載藥量為22.49%。

5、
　　2.苦參堿結(jié)腸緩釋微丸在健康比格犬體內(nèi)的藥動學(xué)研究：LC/MS/MS測定苦參堿血漿濃度在1～2000mg·L-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r=0.9984，權(quán)重1/c2），日內(nèi)和日間精密度試驗RSD均小于9.90%，提取回收率為73.39%～77.68%，符合血漿樣本含量的測定要求?？鄥A結(jié)腸緩釋微丸（受試制劑）與苦參堿普通膠囊（參比制劑）的統(tǒng)計矩參數(shù)Cmax分別為297.25±147.77mg·L-1和1168.88±254.2

6、4mg·L-1，Tmax分別為4.62±1.06 h和1.22±0.41 h，MRT(0-t)分別為7.05±1.95 h和2.65±0.75 h。
　　結(jié)論：
　　本研究以地西泮為內(nèi)標(biāo)物，建立用于血漿中苦參堿的濃度檢測的LC-MS/MS方法，具有專屬性強(qiáng)、靈敏度高、準(zhǔn)確性好的特點(diǎn)，可用于臨床苦參堿血藥濃度的監(jiān)測；所制備的苦參堿結(jié)腸緩釋微丸在比格犬體內(nèi)的藥動學(xué)實驗結(jié)果表明，此微丸具有一定的緩釋作用，并具有結(jié)腸靶向的趨勢，為開