a1腎上腺素受體對NK92-MI細(xì)胞功能影響的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、應(yīng)激(stress)是機體對作用于自身要求的一種非特異性應(yīng)答,涉及神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)和許多其它器官,最初是由內(nèi)分泌學(xué)家H.Selye在20世紀(jì)30年代提出,人們觀察應(yīng)激對機體免疫功能影響時發(fā)現(xiàn),應(yīng)激會導(dǎo)致機體免疫功能低下,其中自然殺傷細(xì)胞(NK細(xì)胞)殺傷活性也受到抑制。
   研究表明,交感神經(jīng)系統(tǒng)(SNS)對免疫組織具有廣泛的支配,交感神經(jīng)的主要遞質(zhì)是去甲腎上腺素(NE),NE的作用是通過腎上腺素受體(AR)來實現(xiàn),根據(jù)AR與其配

2、體結(jié)合特性及功能等差異,將AR主要分為α1、α2和β三大類。α1-AR分為三種亞型,即α1A-、α1B-和α1D-AR,值得重視的是,α1-AR三種亞型功能受體分布的差異,特別是它們在激動劑作用下不同的反應(yīng)和行為特點,可能是造成其功能差異的原因之一。
   在應(yīng)激時,NK細(xì)胞是否存在α1-AR各亞型的表達(dá),NE對NK細(xì)胞的早期凋亡是否有誘導(dǎo)作用,又有何種變化,本實驗研究不同濃度NE對α1-AR表達(dá)以及NK細(xì)胞早期凋亡的變化,進而

3、認(rèn)識神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)對免疫系統(tǒng)的影響。
   方法:
   1、Real-Time PCR檢測各實驗組NK92-MI細(xì)胞α1-AR亞型mRNA的表達(dá)水平,并檢測同時加入α1-AR阻斷劑哌唑嗪后各實驗組α1-AR亞型mRNA的表達(dá)水平變化。
   2、CCK-8法測定不同濃度NE(1×10-12M,1×10-10M,1×10-9M,1×10-8M,1×10-6M)對NK92-MI細(xì)胞作用1h后其殺傷活性的影響。

4、>   3、流式細(xì)胞術(shù)檢測各實驗組NK92-MI細(xì)胞早期凋亡率,并檢測加入α1-AR阻斷劑哌唑嗪或P物質(zhì)后對NK92-MI細(xì)胞早期凋亡的影響。
   結(jié)果:
   NK92-MI細(xì)胞存在α1-AR三種亞型的表達(dá),α1-AR阻斷劑哌唑嗪能夠阻斷NE對α1-AR各亞型表達(dá)的誘導(dǎo)作用;用終濃度為1×10-12M,1×10-10M,1×10-9M,1×10-8M,1×10-6M的NE作用NK92-MI細(xì)胞1h后,在效靶細(xì)胞比為

5、4:1時,各濃度NE對NK92-MI細(xì)胞的殺傷活性有明顯的抑制作用(P<0.05),加入終濃度為1×10-6Mα1-AR阻斷劑哌唑嗪能夠阻斷低濃度NE對NK92-MI細(xì)胞殺傷活性的抑制作用;NE對NK92-MI細(xì)胞早期凋亡有誘導(dǎo)作用,哌唑嗪及SP能夠阻斷1×10-8M的NE對NK92-MI細(xì)胞早期凋亡的誘導(dǎo)作用(P<0.05)。
   結(jié)論:
   1、NK92-MI細(xì)胞表達(dá)α1-AR各亞型。
   2、應(yīng)激濃度

6、NE(1×10-8M)對NK92-MI細(xì)胞α1-AR各亞型的表達(dá)有誘導(dǎo)作用,α1-AR阻斷劑哌唑嗪可阻斷這種作用。
   3、效靶比為4:1時,各濃度的NE(1×10-12M,1×10-10M,1×10-9M,1×10-8M,1×106M)均能降低NK92-MI細(xì)胞殺傷活性。
   4、1×10-6M哌唑嗪對低濃度NE抑制NK細(xì)胞殺傷活性有阻斷作用。
   5、應(yīng)激濃度NE(1×10-8M)可誘導(dǎo)NK92-MI細(xì)

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