a1腎上腺素受體對NK92-MI細胞功能影響的研究.pdf

1、應激(stress)是機體對作用于自身要求的一種非特異性應答，涉及神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)和許多其它器官，最初是由內(nèi)分泌學家H．Selye在20世紀30年代提出，人們觀察應激對機體免疫功能影響時發(fā)現(xiàn)，應激會導致機體免疫功能低下，其中自然殺傷細胞(NK細胞)殺傷活性也受到抑制。
　　 研究表明，交感神經(jīng)系統(tǒng)(SNS)對免疫組織具有廣泛的支配，交感神經(jīng)的主要遞質是去甲腎上腺素(NE)，NE的作用是通過腎上腺素受體(AR)來實現(xiàn)，根據(jù)AR與其配

2、體結合特性及功能等差異，將AR主要分為α1、α2和β三大類。α1-AR分為三種亞型，即α1A-、α1B-和α1D-AR，值得重視的是，α1-AR三種亞型功能受體分布的差異，特別是它們在激動劑作用下不同的反應和行為特點，可能是造成其功能差異的原因之一。
　　 在應激時，NK細胞是否存在α1-AR各亞型的表達，NE對NK細胞的早期凋亡是否有誘導作用，又有何種變化，本實驗研究不同濃度NE對α1-AR表達以及NK細胞早期凋亡的變化，進而

3、認識神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)對免疫系統(tǒng)的影響。
　　 方法:
　　 1、Real-Time PCR檢測各實驗組NK92-MI細胞α1-AR亞型mRNA的表達水平，并檢測同時加入α1-AR阻斷劑哌唑嗪后各實驗組α1-AR亞型mRNA的表達水平變化。
　　 2、CCK-8法測定不同濃度NE(1×10-12M，1×10-10M，1×10-9M，1×10-8M，1×10-6M)對NK92-MI細胞作用1h后其殺傷活性的影響。

4、>　　 3、流式細胞術檢測各實驗組NK92-MI細胞早期凋亡率，并檢測加入α1-AR阻斷劑哌唑嗪或P物質后對NK92-MI細胞早期凋亡的影響。
　　 結果:
　　 NK92-MI細胞存在α1-AR三種亞型的表達，α1-AR阻斷劑哌唑嗪能夠阻斷NE對α1-AR各亞型表達的誘導作用；用終濃度為1×10-12M，1×10-10M，1×10-9M，1×10-8M，1×10-6M的NE作用NK92-MI細胞1h后，在效靶細胞比為

5、4:1時，各濃度NE對NK92-MI細胞的殺傷活性有明顯的抑制作用(P＜0.05)，加入終濃度為1×10-6Mα1-AR阻斷劑哌唑嗪能夠阻斷低濃度NE對NK92-MI細胞殺傷活性的抑制作用；NE對NK92-MI細胞早期凋亡有誘導作用，哌唑嗪及SP能夠阻斷1×10-8M的NE對NK92-MI細胞早期凋亡的誘導作用(P＜0.05）。
　　 結論:
　　 1、NK92-MI細胞表達α1-AR各亞型。
　　 2、應激濃度

6、NE(1×10-8M)對NK92-MI細胞α1-AR各亞型的表達有誘導作用，α1-AR阻斷劑哌唑嗪可阻斷這種作用。
　　 3、效靶比為4:1時，各濃度的NE(1×10-12M，1×10-10M，1×10-9M，1×10-8M，1×106M)均能降低NK92-MI細胞殺傷活性。
　　 4、1×10-6M哌唑嗪對低濃度NE抑制NK細胞殺傷活性有阻斷作用。
　　 5、應激濃度NE(1×10-8M)可誘導NK92-MI細