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1、目的:通過(guò)觀察葛根素預(yù)處理(Puerarin)對(duì)細(xì)菌脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS;或稱(chēng)endotoxin,內(nèi)毒素)體外誘導(dǎo)激活人中性粒細(xì)胞后細(xì)胞內(nèi)核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κB)(P65)及炎性細(xì)胞因子表達(dá)的影響,研究葛根素抑制全身炎癥反應(yīng)綜合癥的分子機(jī)制,為葛根素應(yīng)用于心肌-缺血再灌注損傷心肌保護(hù)作用提供理論依據(jù)。 方法:選擇正常成年志愿者(身體健康、近期未患任何疾病、近期無(wú)用藥、過(guò)度疲勞及煙酒史)。抽取
2、靜脈血15ml,分別作五種處理(每組3ml):(1)空白對(duì)照組;(2)免疫球蛋白同型對(duì)照組;(3)內(nèi)毒素(1ug/ml)處理組;(4)葛根素預(yù)處理(10ug/ml)加內(nèi)毒素(1ug/ml)處理組(實(shí)驗(yàn)組1);(5)葛根素預(yù)處理(50ug/ml)加內(nèi)毒素(1ug/ml)處理組(實(shí)驗(yàn)組2)。采用流式細(xì)胞技術(shù)(Flow cytometry,F(xiàn)CM)檢測(cè)各組全血中中性粒細(xì)胞內(nèi)核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB及炎性細(xì)胞因子白細(xì)胞介素-6(IL-6)和白細(xì)胞介
3、素-8(IL-8)的表達(dá)水平。 結(jié)果:(1)空白組NF-κB的表達(dá)水平很低。與空白組相比,內(nèi)毒素組NF-κB表達(dá)明顯增加(p=0.000,p<0.01),10ug/ml葛根素預(yù)處理組與50ug/ml葛根素預(yù)處理組表達(dá)明顯增加(p=0.018,p<0.05)。10ug/ml及50ug/ml葛根素預(yù)處理組NF-κB表達(dá)明顯低于內(nèi)毒素組(p=0.000,p<0.01)。10ug/ml葛根素預(yù)處理組與50ug/ml葛根素預(yù)處理組相比,沒(méi)
4、有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p>0.05)。(2)空白組基本沒(méi)有IL-6表達(dá)。與空白組相比,內(nèi)毒素組IL-6表達(dá)水平明顯增加(p=0.000,p<0.01),10ug/ml葛根素預(yù)處理組與50ug/ml葛根素預(yù)處理組表達(dá)明顯增加(p=0.000,p<0.01)。10ug/ml及50ug/ml葛根素預(yù)處理組IL-6表達(dá)明顯低于內(nèi)毒素組(p=0.000,p<0.01)。10ug/ml葛根素預(yù)處理組與50ug/ml葛根素預(yù)處理組相比,沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p>0
5、.05)。(3)空白組基本上沒(méi)有IL-8的表達(dá)。與空白組相比,內(nèi)毒素組IL-8表達(dá)明顯增加(p=0.000,p<0.01),10ug/ml葛根素預(yù)處理組與50ug/ml葛根素預(yù)處理組表達(dá)明顯增加(p=0.000,p<0.01)。10ug/ml及50ug/ml葛根素預(yù)處理組IL-8表達(dá)明顯低于內(nèi)毒素組(p=0.000<0.01)。10ug/ml葛根素預(yù)處理組與50ug/ml葛根素預(yù)處理組相比,沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p>0.05)。(4)免疫球蛋
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