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文檔簡介
1、目的:檢測卡波西肉瘤(KS)和對照組中HHV-8DNA的拷貝數(shù);分析兩組樣本中,HHV-8載量的差異;分析不同分期KS皮損中,HHV-8載量的差別;探討HHV-8載量在KS發(fā)病機(jī)制中的意義。
方法:選取我科KS石蠟標(biāo)本結(jié)節(jié)、斑片、斑塊共20例和SCC6例,分別提取基因組DNA,進(jìn)行HHV-8開放閱讀框架(ORF)26PCR擴(kuò)增,建立ORF26的質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品,運用實時熒光定量PCR方法檢測KS與SCC中的病毒載量。
結(jié)果
2、:HHV-8ORF26目的片段成功制備,獲得穩(wěn)定的重組質(zhì)粒,保持了目的片段的特異性和序列完整性,標(biāo)準(zhǔn)曲線參數(shù)良好,ORF26標(biāo)準(zhǔn)品Ct值與其相應(yīng)梯度稀釋標(biāo)準(zhǔn)品濃度呈良好線性關(guān)系,擴(kuò)增效率為89.916%。成功檢測了Kaposi肉瘤與鱗癌中的病毒載量,但所檢測的KS與SCC中的病毒載量比較無明顯差別(t=1.794,P=0.087),P>0.05。分析卡波西肉瘤中不同臨床表型病毒載量的比較(F=1.399,P=0.274)無統(tǒng)計學(xué)意義。<
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