龜鹿益神顆粒對(duì)慢性疲勞大鼠骨骼肌線粒體細(xì)胞色素氧化酶及色素含量的影響.pdf

1、目的：建立大鼠慢性疲勞的動(dòng)物模型，觀察龜鹿益神顆粒對(duì)慢性疲勞大鼠的一般情況及行為學(xué)指標(biāo)（曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)、力竭游泳時(shí)間）的影響，通過(guò)測(cè)定不同組別大鼠骨骼肌線粒體細(xì)胞色素氧化酶（COX）及細(xì)胞色素（Cyt a、Cyt b、Cyt c、Cyt c1）含量的變化來(lái)觀察龜鹿益神顆粒的作用，以期從微觀角度研究龜鹿益神顆粒的抗疲勞機(jī)制。
　　方法:
　　1.造模、分組：雄性SPF級(jí)SD大鼠40只，體重200±20克，適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后隨機(jī)抽取16

2、只不造模，其余24只大鼠根據(jù)改良的曲長(zhǎng)江法進(jìn)行造模，以力竭游泳法、束縛法、夾尾法這一復(fù)合方式構(gòu)建慢性疲勞大鼠模型。在造模結(jié)束后，造模大鼠隨機(jī)分為3組，每組8只，分別為模型組、龜鹿益神組、蓯蓉益腎組；未造模大鼠隨機(jī)分為兩組，每組8只，分別為正常組和龜鹿對(duì)照組。
　　2.給藥方法：正常組、模型組大鼠給予生理鹽水灌胃；龜鹿對(duì)照組、龜鹿益神組大鼠給予龜鹿益神配方顆?；鞈乙汗辔福簧惾匾婺I組給予蓯蓉益腎顆?；鞈乙汗辔?。各組大鼠灌胃1次/d，連

3、續(xù)14天。
　　3.取材：將大鼠成功麻醉后速取大鼠雙側(cè)股四頭肌約1g，制成勻漿液，差速離心得線粒體，超聲波細(xì)胞粉碎儀破壞線粒體膜后低溫保存，整個(gè)過(guò)程均要在4℃或4℃以下進(jìn)行。
　　4.指標(biāo)檢測(cè)：于造模前、造模后、灌胃后分別觀察大鼠的體重、行為學(xué)指標(biāo)（包括力竭游泳時(shí)間、跨格次數(shù)、直立次數(shù)）。通過(guò)紫外分光光度計(jì)，用差光譜法檢測(cè)不同組別大鼠骨骼肌線粒體細(xì)胞色素氧化酶及細(xì)胞色素含量，收集數(shù)據(jù)并用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理。

4、r>　　結(jié)果：
　　1.一般情況：a.大鼠進(jìn)食、糞便、皮毛的改變：造模前，各組大鼠進(jìn)食飲水、糞便、皮毛色澤等均無(wú)明顯差異。造模后，各造模組大鼠均出現(xiàn)不同程度的“脾虛”癥狀：進(jìn)食飲水減少、體重減少、瞇眼、疲怠少動(dòng)、皮毛枯槁無(wú)光、便溏尾臟等；正常組、龜鹿對(duì)照組情況如常。灌胃后，龜鹿益神組、蓯蓉益腎組大鼠進(jìn)食量明顯增加、毛變光滑、活動(dòng)增加，龜鹿益神組增加更明顯。模型組變化不明顯。b.大鼠體重的變化：造模前，各組大鼠體重?zé)o明顯差別。造模后

5、，模型組、龜鹿益神組、蓯蓉益大鼠體重明顯低于正常組，有顯著性差異。三個(gè)造模組間進(jìn)行比較未見明顯差異。灌胃后：模型組大鼠體重明顯低于其余4組，差異具有顯著性；正常組大鼠體重高于蓯蓉益腎組，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而與龜鹿益神組相比，則無(wú)顯著性差異。
　　2.行為學(xué)情況：造模前，各組大鼠跨格直立次數(shù)、力竭游泳時(shí)間無(wú)顯著性差異。造模后，造模各組大鼠跨格直立次數(shù)、力竭游泳時(shí)間均低于正常組，有顯著性差異；各造模組之間比較無(wú)明顯差異。灌胃后，正常

6、組大鼠跨格直立次數(shù)、力竭游泳時(shí)間低于龜鹿對(duì)照組，有顯著性差異，而與龜鹿益神組、蓯蓉益腎組相比，則無(wú)顯著性差異。模型組大鼠跨格直立次數(shù)、力竭游泳時(shí)間顯著低于其余4組，有顯著性差異。龜鹿益神組高于蓯蓉益腎組，有顯著性差異。
　　3.大鼠骨骼肌線粒體細(xì)胞色素氧化酶（COX）、細(xì)胞色素（Cyta、Cytb、Cytc、Cytc1）含量檢測(cè)：龜鹿益神組大鼠骨骼肌線粒體COX、Cyt含量和正常組相比，差別不大，無(wú)顯著性差異。模型組含量均低于其他

7、各組，有顯著性差異。龜鹿益神組含量高于蓯蓉益腎組，差異有顯著性。正常組含量高于蓯蓉益腎組，而低于龜鹿對(duì)照組，均具有顯著性差異。
　　結(jié)論：
　　1.本實(shí)驗(yàn)采用復(fù)合方式構(gòu)建慢性疲勞大鼠模型，將過(guò)度運(yùn)動(dòng)導(dǎo)致身體疲勞與心理應(yīng)激相結(jié)合，高度模擬人體慢性疲勞綜合征發(fā)病的內(nèi)外環(huán)境，確保動(dòng)物模型建立的合理性與科學(xué)性，使本實(shí)驗(yàn)結(jié)果更準(zhǔn)確。
　　2.龜鹿益神顆粒可以顯著提高慢性疲勞大鼠體重、跨格及直立運(yùn)動(dòng)次數(shù)，明顯延長(zhǎng)慢性疲勞大鼠的力竭