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文檔簡介
1、 本文探討重組人肝細胞生長因子對體外培養(yǎng)原代人臍靜脈內(nèi)皮細胞增殖、遷移的影響及其相關作用機制。方法：從人臍靜脈體外消化分離血管內(nèi)皮細胞(HUVECs)，采用含20﹪FBS的DMEM/F12培養(yǎng)HUVECs，通過倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)、電鏡下觀察Weibel-Palade小體及免疫細胞化學染色檢測細胞中FⅧr-Ag的存在等方法對細胞進行鑒定。取第2～4代對數(shù)生長期的內(nèi)皮細胞用于實驗，分別用1ng/ml、10ng/ml、25ng/m
2、l、50ng/ml、100ng/ml濃度rhHGF作用HUVECs 24h、48h及72h后，通過細胞計數(shù)及MTT法檢測細胞增殖情況，采用空白區(qū)玻片法觀察HUVECs的遷移以及透射電鏡下觀察細胞內(nèi)超微結構的改變。在此基礎上，應用流式細胞術及免疫細胞化學SP法檢測細胞周期分布和細胞周期相關蛋白CyclinE、CDK2表達量的改變。結論指出：rhHGF能顯著促進HUVECs的增殖和遷移，提示其可能具有促血管生成作用，而通過上調(diào)Cyclin
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