乳鐵蛋白對去卵巢大鼠IGF-IR、IGFBP-2、IGFBP-4mRNA表達影響的研究.pdf

1、目的：旨在觀察乳鐵蛋白（Lactoferrin LF）對去卵巢大鼠IGF-IR/IGFBP-2/IGFBP-4mRNA基因表達的影響，探討乳鐵蛋白是否通過介導IGF-IR/IGFBP-2/IGFBP-4mRNA基因表達機制治療絕經后骨質疏松。
　　方法：選取6個月大小，體重約在270g左右，雌性SD（Sprague-Dawley）大鼠70只，適應性喂養(yǎng)1周后，入組大鼠隨機分為去卵巢模型組（Ovx）60只與假手術組（Sham）10只

2、，把去卵巢大鼠模型組再次分組，隨機分為不同干預治療組6組，骨質疏松模型組（Con組）10只，實驗中作為對照組：[蒸餾水2ml/(只·天)灌胃]，牛血清白蛋白組（BSA組）10只：[100mg/kg/d+蒸餾水2ml，灌胃]，不同濃度劑量的乳鐵蛋白治療組LF1-3（LF1、LF2和LF3組各10只）：[0.1g/（kg·d）+蒸餾水2ml，1g/（kg·d）+蒸餾水2ml，2g/（kg·d）+蒸餾水2ml，灌胃]，雌激素治療組（E2組）1

3、0只[0.1 mg/（kg·周），肌肉注射]。連續(xù)干預治療6個月后，通過觀察乳鐵蛋白干預前后，體重有無明顯差異；通過制作HE石蠟病理切片,使用顯微鏡觀察骨組織結構變化。再通過Real Time RT-PCR法即實時熒光定量聚合酶鏈反應，檢測去卵巢大鼠骨組織IGF-1R、IGFBP-2、IGFBP-4mRNA表達的改變。
　　結果：⑴乳鐵蛋白干預前，各組大鼠體重均無明顯差異，均P>0.05，大鼠去卵巢手術后，以各種方法干預治療6個月

4、后，除了E2組外，其余各組大鼠體重均明顯升高，均P<0.05，提示差別有統計學意義，體重增加最多的組為Con組，Con組大鼠均明顯重于Sham組和E2組，均P<0.05，提示差別有統計學意義，以不同濃度乳鐵蛋白進行干預的LF1-3組及牛血清白蛋白組大鼠體重與Con組相比，雖然均比Con組體重低，但均P>0.05，提示無統計學意義。⑵骨組織HE染色病理切片顯示：Sham組、E2組骨小梁排列密集、飽滿，間距小，細胞數量多；而Con組、BSA

5、組骨小梁變細、斷裂，骨小梁距離增寬，排列稀疏，細胞數量少，骨小梁結構出現較大的空白區(qū)域；而乳鐵蛋白灌胃組LF1-3介于二者之間，且骨小梁排列緊密程度LF3好于LF2，LF2好于LF1。表明成功建立去卵巢大鼠骨質疏松模型。⑶實時熒光定量PCR結果顯示：Con組IGFBP-2、 IGFBP-4 mRNA相對于Sham組，相對表達量均顯著增高，均P<0.01，差別有顯著統計學意義；相對于Sham組，Con組IGF-1RmRNA相對表達量明顯降

6、低，均P<0.01，差別有顯著統計學意義；與Con組比較LF1-3組（100 mg/kg,1 g/kg and2 g/kg）與E2組IGFBP-2、IGFBP-4mRNA相對表達量明顯下降，且隨著乳鐵蛋白濃度的升高下降得越明顯，均P<0.01，差別有顯著統計學意義；而LF2-3組（1 g/kg and2 g/kg）與E2組IGF-1R mRNA相對表達量均顯著高于Con組，且隨著乳鐵蛋白濃度的升高上升得越明顯，均P<0.05，差別有統計