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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:通過(guò)建立內(nèi)毒素性肝損害的動(dòng)物模型,觀察S-腺苷蛋氨酸(S-adenosylmethionine,SAM)預(yù)處理對(duì)脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)作用下小鼠肝臟的肝X受體(Livet X receptors,LXR)α和Toll樣受體4(Toll like receptor4,TLR4)以及炎癥通路中重要的下游促炎細(xì)胞因子腫瘤壞死因子α(TNF-α)和抑炎細(xì)胞因子白細(xì)胞介素10(IL-10)表達(dá)的影響,探討SA
2、M減輕LPS作用下肝臟的損傷和其作用相關(guān)的可能機(jī)制。
方法:實(shí)驗(yàn)小鼠隨機(jī)均分為三組,NS組:腹腔注射等體積生理鹽水,LPS組:腹腔注射劑量為10mg/kg的LPS,SAM組:腹腔注入10mg/kg的LPS前2h于小鼠腹腔內(nèi)注射100mg/kg的SAM。記錄三組小鼠120h存活率;光鏡和電鏡觀察組織病理學(xué)改變;酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)血清中TNF-α和IL-10的濃度;免疫組織化學(xué)法(SABC)和蛋白免疫印跡法(We
3、stern blot)檢測(cè)肝組織中TLR4和LXRα的蛋白表達(dá)水平;按數(shù)據(jù)類型進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
結(jié)果:S-腺苷蛋氨酸能明顯提高小鼠存活率,SAM組為50.0%,LPS組為30.0%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);光鏡和電鏡觀察比較小鼠肝臟組織病理?yè)p害程度,SAM有效的減輕了內(nèi)毒素性肝損害;SAM組血清中TNF-α水平(718.83±53.27)pg/ml顯著低于LPS組(1791.79±122.19)pg/ml,差異有
4、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);SAM組血清中IL-10(418.69±38.77)pg/ml增加且高峰前移,與LPS組(347.09±31.37)pg/ml比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);免疫組織化學(xué)法(SABC)觀察和蛋白免疫印跡法(Western blot)檢測(cè),SAM組肝組織中LXRα(1.605±0.027)表達(dá)明顯增加,而TLR4(1.365±0.017)表達(dá)則明顯減少,兩者與LPS組LXRα(1.375±0.014)和T
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