S-腺苷蛋氨酸對(duì)大鼠肝臟缺血再灌注損傷線粒體的保護(hù)作用.pdf

1、目的：在肝移植手術(shù)的過(guò)程中，供肝不可避免地要經(jīng)歷缺血再灌注過(guò)程。肝臟對(duì)缺血耐受力較低，肝臟缺血再灌注后，由于脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)增強(qiáng)、氧自由基的大量形成等損傷線粒體而最終導(dǎo)致肝細(xì)胞不同程度的損傷和代謝紊亂。S-腺苷蛋氨酸(SAM)是存在于人體所有組織和體液中的一種生理活性分子，它作為甲基供體和生理性巰基化合物的前體，參與體內(nèi)重要的生化反應(yīng)，對(duì)于肝細(xì)胞再生、分化以及調(diào)節(jié)肝細(xì)胞對(duì)于各種損傷的敏感程度均起非常重要的作用。然而，國(guó)內(nèi)文獻(xiàn)多報(bào)道SAM在

2、防止膽汁淤積方面的作用，而在它對(duì)于肝細(xì)胞缺血再灌注損傷是否也存在保護(hù)作用方面研究尚少。因此，本實(shí)驗(yàn)擬利用大鼠肝臟缺血再灌注模型，以肝細(xì)胞的微觀結(jié)構(gòu)線粒體作為研究對(duì)象，對(duì)比觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物同一時(shí)間點(diǎn)的臨床生化改變、線粒體酶學(xué)變化、能量代謝的變化以及超微結(jié)構(gòu)的改變等方面的變化規(guī)律，從而探索SAM預(yù)處理對(duì)肝臟缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及其部分機(jī)制，為指導(dǎo)今后的實(shí)驗(yàn)研究及其臨床應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。 方法：健康雄性清潔級(jí)SD大鼠54只，隨機(jī)分為3

3、個(gè)組，每組18只，即為對(duì)照組、缺血再灌注組(I/R組)和S-腺苷蛋氨酸預(yù)處理組(SAM組)。每組按缺血后再灌注不同時(shí)間點(diǎn)分別再分為0、1、6小時(shí)組。在上述三個(gè)時(shí)間點(diǎn)抽取下腔靜脈血并切取肝組織制備線粒體，檢測(cè)血清ALT、AST和線粒體GSH、GLDH、SOD、MDA、ATP、ADP、AMP的含量或活力以及用電鏡觀察線粒體超微結(jié)構(gòu)的變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果按同一時(shí)間點(diǎn)I/R組與對(duì)照組比較，SAM組與I/R組比較。 結(jié)果：I/R組血清中的ALT

4、、AST和線粒體GLDH、MDA均顯著高于對(duì)照組，線粒體GSH、SOD、ATP等水平顯著低于對(duì)照組；而SAM組血清中的ALT、AST和線粒體GLDH、MDA與I/R組對(duì)比均有明顯的降低，線粒體GSH、SOD、ATP等水平與I/R組對(duì)比均有明顯的升高，這種差異有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。電鏡觀察，對(duì)照組肝細(xì)胞線粒體結(jié)構(gòu)改變不明顯，大多無(wú)腫脹，線粒體膜完整。I/R組可見(jiàn)線粒體數(shù)量減少，腫脹明顯，嵴模糊不清，基質(zhì)密度低，線粒體膜部分或完全崩解。部分肝

5、細(xì)胞核固縮，在肝細(xì)胞之間還可見(jiàn)到凋亡小體。SAM組與相同時(shí)間點(diǎn)I/R組對(duì)比，肝細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)改變較輕，大部分線粒體輕度腫脹，呈圓形，儀有少數(shù)線粒體膜不完整，未見(jiàn)到肝細(xì)胞核固縮和溶解現(xiàn)象。 結(jié)論：SAM能增強(qiáng)超氧化物歧化酶的活力，清除氧自由基，抑制脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)。SAM能抑制次黃嘌呤核苷向次黃嘌呤轉(zhuǎn)變從而提高肝臟腺苷的濃度，有利于細(xì)胞內(nèi)ATP的產(chǎn)生，最終提高線粒體的能量代謝水平。SAM能增加線粒體GSH池的含量并消弱氧化應(yīng)激反應(yīng)，從