經(jīng)導(dǎo)管射頻消融去腎交感神經(jīng)術(shù)對高血壓犬左室肥厚及VEGFR1-PKG I-Calcineurin通路的影響.pdf

1、目的:
　　明確經(jīng)導(dǎo)管射頻消融去腎交感神經(jīng)術(shù)(RDN)對高血壓犬左室肥厚的影響。其次，觀察經(jīng)導(dǎo)管射頻消融腎交感神經(jīng)對高血壓犬心肌血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)-血管內(nèi)皮生長因子受體-1（VEGFR-1）-cGMP依賴性蛋白激酶-1（PKG-1）-鈣調(diào)神經(jīng)磷酸(Calcineurin)的變化，探討經(jīng)導(dǎo)管射頻消融腎交感神經(jīng)對改善左室肥厚的可能機制。
　　方法:
　　將比格犬(n=28)分為高脂組(n=22)和對照組(n=6)

2、，高脂組予以高脂飲食飼養(yǎng)建立高血壓犬模型，對照組給予普食。12周后，將建模成功的高血壓犬(n=20)隨機分組為手術(shù)組和假手術(shù)組每組10只，實驗過程中手術(shù)組1只、假手術(shù)組2只死亡;最后納入統(tǒng)計分析的比格犬?dāng)?shù)量為手術(shù)組(n=9)和假手術(shù)組(n=8)。手術(shù)組給予射頻消融腎交感神經(jīng)術(shù)，假手術(shù)僅予以腎動脈造影。于基線、術(shù)前、術(shù)后（1、2、4、6月）用無創(chuàng)血壓計測定血壓;同時于基線、術(shù)前、術(shù)后6月行心臟彩超計算心臟各個腔徑、左室重量指數(shù)及E峰/A峰

3、比值。術(shù)后6月處死比格犬，采血、取心臟組織。采用HE染色和電鏡觀察心肌細胞形態(tài);CD31免疫組織化學(xué)方法染心肌組織中毛細血管計算毛細血管密度。Western Blot檢測PKG-1、Calcineurin蛋白表達;Real Time PCR檢測左心室心肌中VEGF、VEGFR-1、PKG-1表達。
　　結(jié)果:
　　1.與對照組相比，假手術(shù)組及手術(shù)組體重、血壓、左室重量指數(shù)均顯著增加(P＜0.05);E峰/A峰比值明顯減低(P

4、＜0.05)。手術(shù)組RDN術(shù)后6月，血壓、左室重量指數(shù)顯著低于假手術(shù)組（P＜0.05)而E峰/A峰比值明顯增高(P＜0.05)。假手術(shù)組血壓、左室重量指數(shù)顯著高于對照組（P＜0.05)。
　　2.與對照組相比，假手術(shù)組犬左室重量明顯增加，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);手術(shù)組左室重量低于假手術(shù)組(P＜0.05)。
　　3.假手術(shù)組HE染色顯示心肌細胞大小、橫截面面積明顯大于手術(shù)組，排列不整齊;電鏡下觀察發(fā)現(xiàn)心肌細胞中可見多

5、個灶型肌絲溶解斷裂、線粒體細胞明顯水腫、線粒體細胞數(shù)明顯減少;CD31免疫組化染色顯示，與手術(shù)組相比，
　　心肌中毛細血管密度顯著減少，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。手術(shù)組心肌細胞大小、橫截面面積明顯小于假手術(shù)組，排列比較整齊;心肌中部分肌絲溶解斷裂、部分線粒體細胞水腫;心肌中毛細血管密度顯著高于假手術(shù)組，但仍然低于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　4.VEGF-VEGFR-1-PKG-1-Calcine

6、urin表達水平的差異:手術(shù)組、對照組心肌VEGF mRNA表達均高于假手術(shù)組，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。手術(shù)組心肌VEGFR-1 mRNA表達、PKG-1mRNA及蛋白表達均明顯高于假手術(shù)組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);與對照組相比，手術(shù)組VEGFR-1mRNA表達差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)而PKG-1 mRNA及蛋白表達明顯增高(P＜0.05);假手術(shù)組VEGFR-1 mRNA表達、PKG-1 mRNA及蛋白表

7、達均明顯低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。手術(shù)組心肌Calcineurin蛋白表達顯著低于假手術(shù)組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);手術(shù)組與對照組相比無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05);假手術(shù)組心肌Calcineurin蛋白表達顯著高于對照組(P＜0.05)。
　　5.VEGFR-1-PKG-1-Calcineurin與左室重量指數(shù)相關(guān)性分析:左室重量指數(shù)與VEGFR-1及PKG-1表達水平均呈負相關(guān)，而與Calcineu