大蒜素誘導(dǎo)LM-8細(xì)胞凋亡及相關(guān)基因表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景和目的：近年來隨著新輔助化療在臨床治療中的廣泛應(yīng)用，骨肉瘤患者的總體生存率有了很大提高，但仍有部分患者對(duì)化療藥物不敏感或耐藥，同時(shí)大劑量化療藥物容易導(dǎo)致一系列的毒副作用，尋找新的安全有效的化療藥物成為提高化療效果的途徑之一。大蒜素（Allicin）又名大蒜新素，化學(xué)名二烯丙基三硫化合物(diallyl trisulfide)，是從大蒜球莖中分離出的硫化物，在中國作為藥物治療各種疾病已經(jīng)有三千多年歷史。許多流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)居民食用大蒜

2、的量與癌癥發(fā)病率和死亡率呈顯著負(fù)相關(guān)體外實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)，大蒜素可以通過調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能、細(xì)胞周期、凋亡和成血管作用等抑制胃癌等多種上皮來源惡性腫瘤生長，但尚未有關(guān)于間葉組織來源如骨肉瘤細(xì)胞的報(bào)道。本論文就大蒜素對(duì)C3H小鼠骨肉瘤細(xì)胞株LM-8細(xì)胞增殖的影響及與Bcl-2、Bax凋亡蛋白表達(dá)的關(guān)系進(jìn)行研究，并初步探索其誘導(dǎo)凋亡的機(jī)制。 方法：用水溶性四唑鹽WST-8比色法檢測(cè)大蒜素對(duì)LM-8細(xì)胞株生長的影響；倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)變

3、化；流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞調(diào)亡率的變化；免疫細(xì)胞組化技術(shù)檢測(cè)Bcl-2和Bax蛋白表達(dá)。 結(jié)果：大蒜素能明顯抑制LM-8細(xì)胞的生長，與大蒜素的濃度和時(shí)間有關(guān)，在72h其藥物半數(shù)抑制率濃度是11.09μg/ml；5μg/ml、10μg/ml和15μg/ml濃度的大蒜素作用72小時(shí)后可誘導(dǎo)LM-8細(xì)胞凋亡(P<0.05)；大蒜素可以降低Bcl-2表達(dá)，增強(qiáng)Bax表達(dá)，經(jīng)15μg/ml大蒜素作用72h，Bcl-2和Bax灰度值及bcl-2