大蒜素誘導(dǎo)體外培養(yǎng)的小鼠淋巴瘤EL4細胞凋亡的研究.pdf

1、大蒜在人們的日常生活和醫(yī)療保健中扮演著重要作用。大蒜素是大蒜榨取物中的一種具有生物活性的有機硫化物，對各種疾病例如心臟病、心腦血管病、關(guān)節(jié)炎、肺病、痢疾、微生物感染等具有很好的治療作用。此外，大量的流行病學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)和實驗研究證實，大蒜素具有非常有效的抗腫瘤作用和比較輕微的細胞毒性，其中最吸引人的地方是它的促進腫瘤細胞凋亡的作用。大蒜素能誘導(dǎo)細胞DNA的降解，細胞質(zhì)空泡化，Caspase蛋白酶的激活和細胞膜膨脹裂解等細胞凋亡的典型特征。

2、因此，弄清大蒜素誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡的具體機制具有非常重要的理論和臨床意義。 實驗?zāi)康模禾骄看笏馑貙w外培養(yǎng)的EL4細胞的增殖和凋亡的作用，并初步探討其誘導(dǎo)凋亡的分子機制。 方法：我們采用臺盼藍拒染法測定細胞的密度和細胞的凋亡率；使用Hoechst 33258熒光染料染色，熒光顯微鏡下拍照檢測細胞凋亡時胞核的形態(tài)；采用TNUEL試劑盒檢測DNA的降解情況；Rhodamine123用于檢測線粒體膜電位的變化。為了研究細胞凋亡的

3、信號途徑，我們采用組織細胞化學(xué)法(IHC)測定凋亡相關(guān)蛋白Bax、Bcl-2，細胞色素C、Caspase-3、-12的表達情況。 結(jié)果顯示：大蒜素能有效的抑制體外培養(yǎng)的EL4細胞的增殖，并誘導(dǎo)細胞的凋亡，具有顯著的劑量和時間依賴效應(yīng)。大蒜素處理后，EL4細胞出現(xiàn)典型的凋亡特征：DNA降解、細胞核固縮，最后凋亡小體形成；同時大蒜素促使線粒體膜電位迅速下降、Bax-Bcl-2比率增大，導(dǎo)致細胞色素C釋放到胞質(zhì)中，激活Caspase-

4、3；另外，大蒜素可以上調(diào)Caspase-12的表達，說明內(nèi)質(zhì)網(wǎng)參與了細胞的凋亡。 結(jié)論：大蒜素能濃度-時間依賴地抑制ELA細胞的增殖、促進細胞的凋亡。其抗腫瘤機制在于大蒜素能引起線粒體通透性增加，改變Bax-Bcl-2蛋白相對表達量，降低EL4細胞線粒體膜電位，細胞色素C釋放入胞質(zhì)，并且激活了Caspase的級聯(lián)反應(yīng)，啟動細胞凋亡。同時，Caspas-12被激活，說明內(nèi)質(zhì)網(wǎng)可能參與凋亡的過程，但其詳細的分子機制仍有待進一步研究。