大蒜素誘導(dǎo)人上皮性卵巢癌耐順鉑SKOV-3-DDP細(xì)胞凋亡及其機(jī)制研究.pdf

1、學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性盧明學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過(guò)的研究成果，也不包含為獲得南昌大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過(guò)的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名( 手寫) ：炙位蘭簽字日期： 山／綽易月／莎日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文

2、作者完全了解南昌大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)南昌大學(xué)可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編本學(xué)位論文。同時(shí)授權(quán)中國(guó)科學(xué)技術(shù)信息研究所和中國(guó)學(xué)術(shù)期刊( 光盤版) 電子雜志社將本學(xué)位論文收錄到《中國(guó)學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)》和《中國(guó)優(yōu)秀博碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)》中全文發(fā)表，并通過(guò)網(wǎng)絡(luò)向社會(huì)公眾提供信

3、息服務(wù)。( 保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書)學(xué)位論文作者簽名( 手寫) ：象乍蘭 導(dǎo)師簽名( 手寫) ：簽字日期：2 - o ／> 年 易月 ，護(hù)日 簽字日期：刃／≯年 多月／D 日摘要摘 要 煳㈣一目的：利用體外培養(yǎng)的人上皮性卵巢癌耐順鉑細(xì)胞株S K O V - 3 ／D D P 細(xì)胞，探討大蒜素( D T ) 單用或與順鉑( D D P ) 聯(lián)用對(duì)S K O V - 3 ／D D P 細(xì)胞的增殖抑制及誘導(dǎo)其細(xì)胞凋亡的分子機(jī)

4、制，為臨床上耐順鉑卵巢癌的治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法：體外培養(yǎng)的S K O V 一3 ／D D P 細(xì)胞，實(shí)驗(yàn)隨機(jī)分為①正常對(duì)照組：②大蒜素作用組( 終濃度分別為5 、1 0 、2 0 、4 0L t g ／m 1 ) ；③J i N 車n 作用組( 終濃度分別為5 、1 0 、2 0 、4 0p ．g ／m 1 ) ；④大蒜素聯(lián)合順鉑組( 于培養(yǎng)基中加入終濃度2 0 ¨g ／m l 大蒜素和終濃度5p g ／m l 順鉑) 。M

5、 T T 法檢測(cè)S K O V 一3 ／D D P 細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用；分別采用普通光學(xué)顯微鏡、G i e m s a 染色和熒光顯微鏡觀察S K O V 一3 ／D D P 細(xì)胞形態(tài)變化；流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡率，分光光度法測(cè)C a s p a s e 一3 活性變化；R T —P C R和W e s t e r nb l o t 分別檢測(cè)凋亡相關(guān)基因P U M A 、B a x 、B c l ．2 和B c l —x l 的m R

6、N A及蛋白的表達(dá)變化。結(jié)果：1 、大蒜素和順鉑分別對(duì)S K O V - 3 ／D D P 細(xì)胞增殖有一定的抑制作用，且呈明顯的濃度一時(shí)間依賴性。不同濃度的大蒜素和順鉑分別作用后光密度值與對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P < O ．0 5 或P < 0 ．0 1 ) 。但相同時(shí)間相同劑量下大蒜素組對(duì)S K O V - 3 ／D D P 細(xì)胞的光密度值明顯低于順鉑組( 尸< 0 ．0 5 或P < 0 ．0 1

7、) ，說(shuō)明大蒜素對(duì)S K O V _ 3 ／D D P 細(xì)胞抑制作用優(yōu)于順鉑。2 、大蒜素聯(lián)合順鉑應(yīng)用對(duì)S K O V - 3 ／D D P 細(xì)胞抑制率明顯高于各自單獨(dú)用藥( P < 0 ．0 1 ) 。大蒜素和順鉑聯(lián)合用藥具有協(xié)同效應(yīng)。3 、大蒜素組和大蒜素聯(lián)合順鉑處理組中可觀察到細(xì)胞凋亡所特有的典型形態(tài)學(xué)特征4 、大蒜素能誘導(dǎo)S K O V - 3 ／D D P 細(xì)胞凋亡，顯著提高細(xì)胞凋亡率，其中4 0j ．t g ／m l

8、大蒜素4 8 h 作用細(xì)胞早期凋亡率( 2 5 ．7 士4 ．4 1 ) ％顯著高于正常對(duì)照組( 4 ．5 土1 ．1 2 ) ％( 尸< 0 ．0 1 ) ；大蒜素聯(lián)合順鈾處理組誘導(dǎo)S K O V - 3 ／D D P 細(xì)胞的早期凋亡的作用優(yōu)于兩者單純用藥( P < 0 ．0 5 或P < 0 ．0 1 ) ，具有協(xié)同作用。5 、大蒜素能提高C a s p a s e 一3 活性，4 0p g ／m l 大蒜素4 8