Rig-I在HIV-1感染人巨噬細(xì)胞過(guò)程中的作用機(jī)制研究.pdf

1、人類免疫缺陷病毒(HIV-1)在最初幾周內(nèi)通過(guò)感染單核吞噬細(xì)胞來(lái)通過(guò)血腦屏障。這些被HIV-1感染的單核吞噬細(xì)胞被認(rèn)為是病毒感染的儲(chǔ)存庫(kù)，并引起艾滋病毒相關(guān)的神經(jīng)認(rèn)知功能障礙(HAND)。雖然有很多文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)HIV-1感染引起的先天免疫反應(yīng)，但什么蛋白在巨噬細(xì)胞中感應(yīng)HIV-1還不為人知。維甲酸誘導(dǎo)基因Ⅰ(RIG-Ⅰ)存在于細(xì)胞溶質(zhì)中，可在漿細(xì)胞樣樹突狀細(xì)胞中感應(yīng)HIV-1感染。在我們的研究工作中，我們致力于研究RIG-Ⅰ在感應(yīng)HIV-1

2、感染巨噬細(xì)胞并引起Ⅰ型干擾素反應(yīng)中所起的作用。我們收集的腦組織分別來(lái)自沒(méi)有癡呆癥狀并且血清中HIV陰性，HIV血清陽(yáng)性但不顯現(xiàn)癡呆癥狀，艾滋病毒相關(guān)性相關(guān)癡呆病人，并用這些腦組織蛋白樣品檢測(cè)RIG-Ⅰ表達(dá)水平。HIV-1 ADA，Clade B和Clade C用于感染人類單核細(xì)胞來(lái)源的巨噬細(xì)胞。RIG-Ⅰ及其細(xì)胞內(nèi)的下游信號(hào)通路用實(shí)時(shí)熒光定量PCR和western進(jìn)行檢測(cè)。小干擾RNA沉默RIG-Ⅰ來(lái)檢測(cè)其是否參與Ⅰ型干擾素反應(yīng)。數(shù)據(jù)用

3、ANOVA進(jìn)行評(píng)估，組間差異用Tukey-post-test進(jìn)行檢測(cè)。
　　我們結(jié)果顯示，同收集的腦組織分別來(lái)自沒(méi)有癡呆癥狀并且血清中HIV陰性，HIV血清陽(yáng)性但不顯現(xiàn)癡呆癥狀相比，艾滋病毒相關(guān)性相關(guān)癡呆病人中RIG-Ⅰ表達(dá)水平顯著升高。在人類單核細(xì)胞衍生的巨噬細(xì)胞和小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞中，用嗜巨噬細(xì)胞的HIV-1 ADA或支系B，支系C感染可以顯著提高細(xì)胞中RIG-Ⅰ mRNA和蛋白質(zhì)水平。并且RIG-Ⅰ的表達(dá)上升和STAT1磷酸化呈