漢防己甲素抑制PANC-1細(xì)胞增殖作用的機(jī)制探討.pdf

1、第一部分 漢防己甲素對PANC-1細(xì)胞增殖作用的影響
　　 目的:
　　 觀察漢防己甲素對人胰腺癌細(xì)胞株P(guān)ANC-1細(xì)胞增殖的影響。
　　 方法:
　　 1.MTT法檢測PANC-1細(xì)胞對不同濃度漢防己甲素的藥物敏感性。
　　 2.流式細(xì)胞術(shù)檢測漢防己甲素對PANC-1細(xì)胞周期的影響。
　　 3.流式細(xì)胞術(shù)檢測漢防己甲素對PANC-1細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)作用。
　　 結(jié)果:
　　

2、 1.MTT結(jié)果顯示漢防己甲素對PANC-1細(xì)胞增殖抑制作用呈明顯的濃度和時間依賴性。不同濃度漢防己甲素作用PANC-1細(xì)胞24 h和72 h，IC50分別約為17 mmol/L和10 mmol/L。80 mmol/L 漢防己甲素處理72 h，PANC-1細(xì)胞的抑制率達(dá)到100％。
　　 2.PANC-1細(xì)胞經(jīng)漢防己甲素處理24 h后，流式細(xì)胞術(shù)檢測到明顯的細(xì)胞G1期阻滯(G1期細(xì)胞比例可增至68.19％)，而S期細(xì)胞比例則顯著

3、降低(可降至23.82％)。G2/M期細(xì)胞比例增加(可增至7.98％)。
　　 3.漢防己甲素處理PANC-1細(xì)胞24h，流式細(xì)胞術(shù)檢測到較明顯的細(xì)胞凋亡發(fā)生(凋亡率8.29％)。
　　 結(jié)論:
　　 1.漢防己甲素能有效抑制PANC-1細(xì)胞增殖，IC50在微摩爾水平。
　　 2.漢防己甲素能顯著引起PANC-1細(xì)胞G1期阻滯，并降低S期細(xì)胞比例。G2/M
　　 期細(xì)胞比例也有所增加。
　　

4、 3.漢防己甲素可誘導(dǎo)PANC-1細(xì)胞凋亡的發(fā)生。
　　 第二部分 己甲素抑制PANC-1細(xì)胞增殖作用的機(jī)制探討
　　 目的:
　　 探討漢防己甲素抑制PANC-1細(xì)胞增殖作用的可能分子機(jī)制。
　　 方法:
　　 1.實時定量PCR檢測PANC-1細(xì)胞經(jīng)漢防己甲素處理24-72 h后細(xì)胞周期相關(guān)基因P21cip/waf1、c-myc、Cdc25A、E2F1和凋亡相關(guān)基因survivin mRNA

5、水平變化。
　　 2.Western blot檢測經(jīng)漢防己甲素處理24-72 h后PANC-1細(xì)胞P21cip/waf1蛋白表達(dá)水平的改變。
　　 結(jié)果:
　　 1實時定量PCR結(jié)果顯示，PANC-1細(xì)胞經(jīng)漢防己甲素處理24 h，與對照組相比，P21cip/waf1 mRNA水平明顯增加，而Cdc25A、c-myc、E2F1、survivin mRNA 水平均下降。
　　 2.Western blot結(jié)果