漢防己甲素滴眼液抑制角膜移植排斥反應(yīng)的療效及機制研究.pdf

1、中山大學(xué)博士學(xué)位論文漢防己甲素滴眼液抑制角膜移植排斥反應(yīng)的療效及機制研究姓名：張悅申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：眼科學(xué)指導(dǎo)教師：胡世興20060422摘耍 張悅 博E 論文果。F K 5 0 6 免疫抑制作用雖遠(yuǎn)強于C s A ，并且已取得了明顯的臨床治療效果，但由于其價格昂貴，使得其臨床長期應(yīng)用難以得到普及。漢防己甲素( T e t r a n d r i n e ．“ V e t ) 又名粉防己堿，是從中草藥粉防己的根塊中提取的雙芐基異唾

2、啉類生物堿，是粉防己的主要有效成分，早期研究表明漢防己甲素具有消炎、鎮(zhèn)痛、降壓、抗纖維化等廣泛藥理作用。T e t 可通過鈣離子拮抗作用，降低中性粒細(xì)胞內(nèi)的鈣離子濃度，降低c a ”．C a m 活性，一方面抑制P L A 2 活性，減少前列腺素、白三烯、血栓素、血小板活化因子( P A Y ) 等炎性介質(zhì)釋放；另一方面T e t 可丌高c A M P ，減少溶酶體酶釋放和氧自由基生成而發(fā)揮抗炎作用。除此之外，眼科基礎(chǔ)實驗研究還證實T

3、e t 在抑制免疫性炎癥、對抗增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變，抑制視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤腫瘤細(xì)胞增殖方面都有一定的作用。本研究擬通過現(xiàn)代醫(yī)學(xué)手段，將中藥漢防己甲素滴眼液劑型應(yīng)用于實驗性角膜移植術(shù)后，觀察其抑制角膜植片免疫排斥反應(yīng)的療效，并探討機制，從而為其臨床推廣使用提供理論依據(jù)。第一部分動物模型制各及漢防己甲素滴眼液有效治療濃度的篩選目的制各大鼠角膜移植免疫排斥反應(yīng)動物模型，研究漢防己甲素滴眼液治療角膜移植免疫排斥反應(yīng)效果，并確定其最佳治療濃度。 方

4、法建立S D —W i s t a r 大鼠角膜移植排斥反應(yīng)模型，將實驗動物分為5 組。I 組為正常眼組，I I 組為陰性對照組( 角膜移植術(shù)后應(yīng)用1 ．O ％甲基纖維素滴眼液) ，1 1 1 組為O ．3 ％漢防己甲素滴眼液治療組，I v 組為0 ．5 ％漢防己甲素滴眼液治療組，v 組為I ．0 ％漢防己甲素滴眼液治療組。對各組大鼠角膜植片存活情況、角膜透明性、角膜基質(zhì)水腫情況、新生血管進行評分比較。應(yīng)用印跡細(xì)胞學(xué)( i m p r

5、e s s i o nC y t o l o g y , I C ) 、H E 、P A S 染色技術(shù)檢測各組結(jié)膜杯狀細(xì)胞情況，并進行比較。通過免疫組織化學(xué)H E 染色技術(shù)對各組角膜植片水腫情況進行比較，對角膜植片炎癥細(xì)胞進行分類、計數(shù)，并進行比較分析。結(jié)果1 ．O ．3 ％、O ．5 ％、1 ．O ％漢防己甲素滴眼液治療組角膜植片中央出現(xiàn)新生血管的時間分別為1 8 ．1 4 士2 ．5 5 d 、2 4 ．11 土2 ．6 9 d 、