GSH耗竭在芹菜素誘導(dǎo)胰腺癌PANC-1細(xì)胞凋亡中的作用.pdf

1、目的:研究芹菜素(API)誘導(dǎo)人胰腺癌PANC-1細(xì)胞凋亡作用，并探討細(xì)胞內(nèi)谷胱甘肽(GSH)耗竭是否參與其誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡作用。
　　方法:不同濃度API(20.0、40.0、80.0μmol/L)處理體外培養(yǎng)胰腺癌PANC-1細(xì)胞。碘化丙啶(PI)染色流式細(xì)胞術(shù)(FCM)分析細(xì)胞凋亡率；酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定細(xì)胞組蛋白/DNA碎片水平。Hoechst33258染色熒光顯微鏡觀察細(xì)胞凋亡形態(tài)改變。分光光度法測定細(xì)胞內(nèi)GSH

2、含量。
　　結(jié)果:PI染色FCM結(jié)果表明，API(20.0、40.0、80.0μmol/L)孵育24 h，胰腺癌PANC-1細(xì)胞凋亡率逐次增加，呈劑量依賴性。ELISA測定結(jié)果顯示，API(20.0、40.0、80.0μmol/L)顯著誘導(dǎo)胰腺癌 PANC-1細(xì)胞組蛋白/DNA碎片增加。Hoechst33258染色熒光顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn) API(20.0、40.0、80.0μmol/L)導(dǎo)致胰腺癌PANC-1細(xì)胞的典型凋亡形態(tài)學(xué)變化，

3、例如細(xì)胞核固縮、核碎裂等；同時，細(xì)胞凋亡指數(shù)以濃度依賴方式增高。分光光度法測定結(jié)果證明，API(20.0、40.0、80.0μmol/L)作用3 h,胰腺癌PANC-1細(xì)胞內(nèi)GSH含量隨藥物濃度增高逐次降低。此外，外源性GSH預(yù)孵育能對抗API誘導(dǎo)PANC-1細(xì)胞GSH耗竭作用；并能有效阻斷API誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡率和組蛋白/DNA碎片增加效應(yīng)。
　　結(jié)論:
　　1. API具有誘導(dǎo)胰腺癌PANC-1細(xì)胞凋亡作用，呈濃度依耐性。<