甲基強(qiáng)的松龍預(yù)干預(yù)脊髓缺血再灌注損作的基礎(chǔ)和臨床研究.pdf

1、脊髓損傷可分為原發(fā)性損傷和繼發(fā)性損傷。原發(fā)性損傷是指受傷瞬間由于沖擊或壓迫等外力產(chǎn)生的不可逆損傷,目前尚無法對其進(jìn)行有效治療。繼發(fā)性損傷則是在原發(fā)損傷后,由于各種因?yàn)橐鸬募顾柙贀p傷。人們通過對其大量的基礎(chǔ)和臨床研究,認(rèn)為繼發(fā)性損傷是造成脊髓損傷的重要因素。MP是美國FDA批準(zhǔn)唯一用于治療急性脊髓損傷(SCI)的藥物。根據(jù)美國NASCISⅡ、Ⅲ報(bào)告臨床試驗(yàn)結(jié)果,大劑量MP沖擊治療SCI的方案已廣泛應(yīng)用于臨床。也即是它能對繼發(fā)性脊髓損傷發(fā)

2、揮作用,保護(hù)脊髓的神經(jīng)細(xì)胞。缺血再灌注脊髓損傷是引起繼發(fā)性脊髓損傷的重要機(jī)制。在某種損傷因子作用下,脊髓神經(jīng)經(jīng)過一定時(shí)間缺血,盡管得到了血液再灌注,卻出現(xiàn)了明顯的功能障礙,甚至出現(xiàn)不可逆性脊髓神經(jīng)元遲發(fā)性死亡,這種現(xiàn)象稱為脊髓缺血再注損傷。
　　 甲基強(qiáng)的松龍(MP)是一種人工合成糖皮質(zhì)激素,在原有激素分子結(jié)構(gòu)的B環(huán)上增加一個(gè)甲基,從而使新合成激素的抗炎作用明顯增加,MP的作用機(jī)理是抑制急性脊髓損傷后的繼發(fā)性改變。主要表現(xiàn)在:抑

3、制脂質(zhì)過氧化和自由基反應(yīng),穩(wěn)定細(xì)胞膜,抑制花生四烯酸等炎性介質(zhì)的釋放和脂質(zhì)水解；改善損傷脊髓的血液循環(huán)；促進(jìn)神經(jīng)元細(xì)胞的新陳代謝；提高神經(jīng)元應(yīng)激性和突觸傳導(dǎo)性；減少細(xì)胞內(nèi)鈣離子聚集。
　　 在臨床脊柱外科,嚴(yán)重脊髓型頸椎病等脊髓嚴(yán)重受壓疾病的手術(shù)存在脊髓缺血再灌注損傷的高度風(fēng)險(xiǎn),能否在此類手術(shù)前,預(yù)防性應(yīng)用甲基強(qiáng)的松龍,以期減少脊髓缺血再灌注損傷?如果有這種可能,那么,預(yù)防性應(yīng)用MP的最佳時(shí)間、最佳劑量又如何選擇?本研究目的即在

4、于此。
　　 方法：
　　 1.制備大鼠脊髓缺血再灌注損傷動(dòng)物模型。
　　 2.實(shí)驗(yàn)一:在脊髓缺血再灌注損傷前30min應(yīng)用MP30mg/kg,觀察脊髓缺血再灌注損傷前、后光鏡下細(xì)胞形態(tài),應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色,采用圖像分析系統(tǒng)測量陽性染色物質(zhì)吸光度,進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,判定MP預(yù)防應(yīng)用是否可減少脊髓缺血再灌注損傷。
　　 3.實(shí)驗(yàn)二:在脊髓缺血再灌注損傷前30min,分別應(yīng)用MP10mg/kg、20mg/kg

5、、30mg/kg,觀察脊髓缺血再灌注損傷前、后光鏡下細(xì)胞形態(tài),,應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色,采用圖像分析系統(tǒng)測量陽性染色物質(zhì)吸光度,進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,判定在脊髓缺血再灌注損傷前應(yīng)用MP的最佳劑量。
　　 4.實(shí)驗(yàn)三:在脊髓缺血再灌注損傷前3h、1h、30min應(yīng)用MP30mg/kg,觀察脊髓缺血再灌注損傷前、后光鏡下細(xì)胞形態(tài),,應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色,采用圖像分析系統(tǒng)測量陽性染色物質(zhì)吸光度,進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,判定在脊髓缺血再灌注損傷前應(yīng)用M

6、P的最佳時(shí)間。
　　 5.根據(jù)以上研究得出的結(jié)論,并把結(jié)論應(yīng)用于臨床嚴(yán)重脊髓型頸椎病中,在最佳應(yīng)用MP的時(shí)間點(diǎn),應(yīng)用最佳劑量MP,根據(jù)術(shù)前、術(shù)后JOA評分,判定MP預(yù)干預(yù)是否有效,何種劑量預(yù)防作用最佳,以及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的用藥劑量是否與臨床所用劑量相符。
　　 結(jié)果：
　　 實(shí)驗(yàn)一:
　　 1.預(yù)防應(yīng)用MP后神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)較未用藥時(shí)改變少。
　　 2.SCⅡ組脊髓組織內(nèi)HSP27顯著表達(dá),與對照組比差異具

7、有顯著性(P<0.05)。
　　 3.MP組脊髓細(xì)胞內(nèi)HSP27表達(dá)更顯著,與SCⅡ組對比差異有顯著性(P<0.05)。
　　 4.大鼠脊髓缺血再灌注損傷后后肢功能評分降低,MP預(yù)處理組后肢運(yùn)動(dòng)功能評分提高(P<0.05)。
　　 實(shí)驗(yàn)二:
　　 1.以10mg/Kg、20mg/Kg、30mg/Kg三個(gè)不同劑量,預(yù)防使用MP,其預(yù)防脊髓缺血再灌注損傷的程度有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。
　　 2.

8、以30mg/Kg的劑量,預(yù)防應(yīng)用MP,其減輕脊髓損傷病理改變和上調(diào)HSP27表達(dá)的能力最強(qiáng)(P<0.05),20m/Kg次之(P<0.05),10mg/Kg則無明顯效果(P>0.05)。
　　 實(shí)驗(yàn)三:
　　 1.在脊髓缺血再灌注前30min、1h、3h三個(gè)時(shí)間點(diǎn),預(yù)防使用MP,其預(yù)防脊髓缺血再灌注損傷的程度統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。
　　 2.提前30min預(yù)防應(yīng)用MP,其減輕脊髓損傷病理改變和上調(diào)HSP27

9、表達(dá)的能力最強(qiáng)(P<0.05),1h次之(P<0.05),3h則無明顯效果(P>0.05)。
　　 臨床研究:
　　 1.10天-3個(gè)月內(nèi),以三個(gè)不同的劑量預(yù)防應(yīng)用于嚴(yán)重脊髓型脊椎病,均表現(xiàn)出對缺血再灌注損傷的預(yù)防作用(P<0.05)。
　　 2.以20mg/Kg、30mg/Kg的劑量預(yù)防應(yīng)用,與10mg/Kg的劑量相比,其臨床效果有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。
　　 3.術(shù)前10mg/Kg、20mg/K

10、g、30mg/Kg的劑量預(yù)防應(yīng)用與術(shù)后1小時(shí)應(yīng)用10mg/Kg相比,其臨床效果有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。
　　 4.以20mg/Kg、30mg/Kg的劑量預(yù)防應(yīng)用,其兩者之間臨床效果沒有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 在MP預(yù)干預(yù)脊髓缺血再灌注損傷的以上三個(gè)基礎(chǔ)研究中,我們認(rèn)為:
　　 1.在大鼠脊髓缺血再灌注損傷前預(yù)防應(yīng)用MP可以減少脊髓損傷。
　　 2.預(yù)防用藥的劑量