甲基強(qiáng)的松龍對(duì)深低溫腦缺血再灌注大鼠S-100蛋白影響的研究.pdf

1、目的：深低溫停循環(huán)和深低溫低流量方法在心臟外科得到廣泛應(yīng)用，但其暫時(shí)或永久的神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥卻高達(dá)4﹪～25﹪(平均8﹪)，而且安全時(shí)限在45～60分鐘，限制了該方法的臨床應(yīng)用。近年來(lái)研究顯示這些遲發(fā)性的神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥與腦缺血再灌注損傷有關(guān)。本研究采用深低溫腦缺血再灌注大鼠模型，應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)技術(shù)(ELISA)、HE染色、免疫組化(SABC)和RT-PCR技術(shù)分別觀察甲基強(qiáng)的松龍對(duì)深低溫腦缺血再灌注大鼠S-100蛋白的影響。

2、 方法：第一部分深低溫腦缺血再灌注大鼠模型的建立：將健康SD大鼠麻醉后用冰袋包埋降溫至(21±1)℃，阻斷雙側(cè)頸總動(dòng)脈，記錄體溫、心率、血壓、血氧飽和度并做血?dú)夥治觯?0分鐘后恢復(fù)頸總動(dòng)脈血流，并行復(fù)溫至復(fù)蘇。 第二部分甲基強(qiáng)的松龍對(duì)深低溫腦缺血再灌注大鼠血清S-100蛋白影響的研究：將SD大鼠，隨機(jī)分為3組：假手術(shù)組、模型組、甲強(qiáng)龍?zhí)幚斫M。模型組和甲強(qiáng)龍?zhí)幚斫M(每組再分為缺血60min再灌注后2h、6h、12h、1d、2d、3

3、d、7d共7個(gè)小組)。建立深低溫腦缺血再灌注大鼠模型后，用酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)定量檢測(cè)不同時(shí)相點(diǎn)血清S-100β蛋白水平。 第三部分甲基強(qiáng)的松龍對(duì)深低溫腦缺血再灌注大鼠腦S-100β蛋白表達(dá)影響的研究：用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)腦缺血再灌注大鼠各時(shí)間點(diǎn)腦組織中S-100β蛋白的動(dòng)態(tài)變化。 第四部分甲基強(qiáng)的松龍對(duì)深低溫腦缺血再灌注大鼠腦S-100mRNA表達(dá)的影響：用RT-PCR技術(shù)觀察大鼠腦皮層組織S-100mRNA的動(dòng)態(tài)變化及

4、MP對(duì)其表達(dá)的影響。 用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。 結(jié)果：(1)ELISA檢測(cè)結(jié)果：假手術(shù)組血清S-100β為(0.24±0.02)ug/l，模型組和甲強(qiáng)龍?zhí)幚斫M6h～2d血清S-100β蛋白水平均比假手術(shù)組高(P＜0.01)，甲強(qiáng)龍?zhí)幚斫M血清S-100β蛋白水平比模型組低(P＜0.01)。 (2)免疫組化法檢測(cè)結(jié)果：假手術(shù)組S-100β蛋白呈基礎(chǔ)水平的表達(dá)。模型組和甲強(qiáng)龍?zhí)幚斫M于深低溫腦缺血再灌注后