免疫負(fù)調(diào)控基因在造血干細(xì)胞移植后移植物抗宿主病中的調(diào)控作用.pdf

1、目的：初步研究免疫負(fù)調(diào)控基因β-arrestin、Tim-3及SOCS-3在異基因造血干細(xì)胞移植（allo-HSCT）后早期（即移植后100天內(nèi)）的表達(dá)情況；探討其在急性移植物抗宿主?。╝GVHD）中的調(diào)控作用。
　　方法：選擇2011年03月至2012年01月在蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院行異基因造血干細(xì)胞移植的97例患者作為研究對(duì)象：1）觀察并收集其移植類型、aGVHD的發(fā)生情況、其它并發(fā)癥、復(fù)發(fā)及生存情況。2）采集移植患者各時(shí)間點(diǎn)（

2、移植后30天、45天、60天、90天，發(fā)生aGVHD時(shí)）的EDTA抗凝外周血標(biāo)本6ml，同時(shí)留取正常人的標(biāo)本作為基礎(chǔ)表達(dá)水平，F(xiàn)icoll法分離出其中單個(gè)核細(xì)胞（PBMC），抽提總RNA并逆轉(zhuǎn)為cDNA，采用實(shí)時(shí)定量PCR的方法，檢測(cè)上述各免疫負(fù)調(diào)控基因mRNA的相對(duì)表達(dá)水平，研究移植后100天內(nèi)各負(fù)調(diào)控基因在發(fā)生aGVHD的患者與未發(fā)生aGVHD的患者中的表達(dá)變化趨勢(shì)；研究aGVHD發(fā)生時(shí)各負(fù)調(diào)控基因表達(dá)量的變化，以及不同移植類型移植

3、患者中的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：1）無aGVHD組和aGVHD組比較，無aGVHD組β-arrestin基因表達(dá)在移植后30天較aGVHD組明顯偏低（P﹤0.001），且低于正常水平（P﹤0.001）；在45天及之后時(shí)間點(diǎn)各組患者β-arrestin恢復(fù)至正常水平；aGVHD組Tim-3基因表達(dá)水平在移植后90天內(nèi)均低于正常水平(P﹤0.05),而無aGVHD組Tim-3表達(dá)水平一直保持在正常水平附近（P＞0.05）；SOCS-3在

4、無aGVHD組移植后45天時(shí)表達(dá)升高（P＜0.05），60天時(shí)恢復(fù)至移植前水平,aGVHD組病人中SOCS-3在45天時(shí)升高更顯著（P＜0.01），且在90天時(shí)仍未恢復(fù)至正常水平（P＜0.05）。2）比較各基因在aGVHD發(fā)生時(shí)與同移植類型、同時(shí)間點(diǎn)未發(fā)生aGVHD者的表達(dá)水平。β-arrestin、SOCS-3的表達(dá)水平較同時(shí)間點(diǎn)無aGVHD患者顯著升高（P＜0.01），在aGVHD好轉(zhuǎn)后均呈下降趨勢(shì)；Tim-3的表達(dá)則在aGVHD時(shí)

5、明顯降低（P＜0.05），且在整個(gè)aGVHD過程中無升高趨勢(shì)。3)不同移植類型組間在移植后各時(shí)間點(diǎn)Tim-3和SOCS3表達(dá)水平有差異（組間P值﹤0.05）。其中，同胞移植組Tim-3表達(dá)水平在移植后各時(shí)間點(diǎn)均較臍血移植組明顯偏高；在移植后45天、60天和90天較單倍體移植組也明顯偏高。而同胞移植組的SOCS3表達(dá)水平在移植后45天和60天較其他各移植組均明顯偏低（P值﹤0.05，圖10）,不同移植組間β-arrestin的表達(dá)水平無明

6、顯差異（P＞0.05）
　　結(jié)論：β-arrestin在移植后30天的表達(dá)水平與aGVHD的發(fā)生有顯著相關(guān)性，Tim-3在移植后aGVHD患者各時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)水平均顯著降低，SOCS3在移植后45天、60天和90天的表達(dá)水平升高與aGVHD的發(fā)生有顯著相關(guān)性。同胞全相合組與臍血移植組和單倍體移植組間Tim-3的表達(dá)水平存在差異，同胞全相合移植與其他移植類型間SOCS3的表達(dá)水平存在差異，β-arrestin在不同移植類型間無顯著表達(dá)