吡柔比星對鼻咽癌細(xì)胞株CNE2生長和XIAP表達(dá)的影響.pdf

1、目的: X連鎖凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protein, XIAP)在許多腫瘤中均高表達(dá),而它在正常分化成熟組織中不表達(dá)或低表達(dá),與腫瘤的發(fā)生發(fā)展有十分密切的關(guān)系。探討化療藥物吡柔比星對鼻咽癌細(xì)胞株CNE2增殖、克隆形成和凋亡抑制基因XIAP mRNA和蛋白表達(dá)的影響,為鼻咽癌治療與研究提供新的靶點(diǎn)。
　　方法: 體外培養(yǎng)鼻咽癌細(xì)胞株CNE2,于37℃,5％CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),

2、細(xì)胞對數(shù)生長期時(shí)加入不同濃度的吡柔比星處理后,用 MTT法檢測細(xì)胞增殖情況;采用克隆形成實(shí)驗(yàn)觀察細(xì)胞克隆形成;用RT-PCR方法檢測鼻咽癌細(xì)胞株 XIAP mRNA的表達(dá)情況;制作細(xì)胞爬片做免疫細(xì)胞化學(xué)了解細(xì)胞株XIAP蛋白的表達(dá)。應(yīng)用 SPSS11.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,采用方差分析(ANOVA),P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果: MTT結(jié)果顯示加入臨床用藥濃度1倍、臨床用藥濃度的1/10倍、臨床用藥濃度的1/1

3、00倍作用24h對細(xì)胞的抑制率分別為74±0.3%、39±0.5%、13±0.2%;作用48h對細(xì)胞的抑制率分別為83±0.4%、77±1.1%、19±0.5%。因此,吡柔比星對細(xì)胞的抑制作用具有明顯的時(shí)效和量效關(guān)系。克隆形成實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明1倍臨床用藥量細(xì)胞克隆數(shù)(90±5)、1/10倍臨床用藥量細(xì)胞克隆數(shù)(264±8)與對照組細(xì)胞克隆數(shù)(403±10)相比有顯著性意義(P﹤0.05)。隨著藥物濃度的增加而克隆數(shù)減少,克隆變小。RT-PC

4、R法檢測顯示XIAP mRNA表達(dá)下調(diào),對照組、加臨床用藥量1/10組及加臨床用藥量1倍組XIAP與β-actin的比值分別為0.97±0.015、0.53±0.020、0.18±0.011。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,三組之間P﹤0.05均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。免疫細(xì)胞化學(xué)結(jié)果提示XIAP蛋白在胞漿和胞核中均有表達(dá),加藥組與對照組相比較,XIAP蛋白表達(dá)明顯下調(diào)且藥物濃度越大下調(diào)作用越明顯。
　　結(jié)論:
　　1吡柔比星可抑制體外培養(yǎng)的鼻咽癌細(xì)胞