CYP2E1基因多態(tài)性與酒精性肝病關系的研究.pdf

1、[目的]：酒精性肝病是因長期、大量飲用各種含乙醇的飲料所致的肝臟損害性病變，臨床流行病學資料顯示，并非所有重度嗜酒者都發(fā)展為酒精性肝病，遺傳性因素可能起一定的作用，細胞色素P4502E1是非乙醇脫氫酶系乙醇代謝的主要酶類，具有基因多態(tài)性。本文通過檢測細胞色素P4502E1不同基因型及等位基因頻律在健康對照組、嗜酒無肝病組和酒精性肝病組中的差異，以期從遺傳學角度揭示酒精性肝病的發(fā)病機制，為臨床防治酒精性肝病的發(fā)生提供實驗依據。 [

2、方法]：設立健康對照組、嗜酒無肝病組和酒精性肝病組，每組收集20例，均為成年男性、漢族。每例病人空腹抽取外周靜脈血2ml，EDTA防凝處理后，用凍融法從細胞中提取DNA，將抽提的DNA純化、沉淀、溶解。然后，進行目的DNA的PCR擴增。之后分別加入PstⅠ和RsaⅠ內切酶進行酶切。CYP2E1基因被分為3種基因型：A(c1/c1純合子)、B(c1/c2雜合子)、C(c2/c2純合子)，存在2種等位基因c1和c2。分別取少量消化后產物在2

3、％的瓊脂糖凝膠上進行電泳，用捷達圖像分析系統(tǒng)V3.3處理，以確定等位基因的基因型。三組各等位基因頻率及各基因型頻率的比較采用X2檢驗，分析CYP2E1基因多態(tài)性與酒精性肝病發(fā)生的關系。 [結果]CYP2E1基因在酒精性肝病組中A、B和C型基因分布分別為：3例(15％)、16例(80％)和1例(5％)；嗜酒無肝病組A型為20例(100％)；健康對照組中A、B型基因分別為17例(85％)和3例(15％)。酒精性肝病組與嗜酒無肝病組和

4、健康對照組相比較，三種基因型的分布有顯著差異(p＜0.005)，B基因型在酒精性肝病組顯著升高。嗜酒無肝病組和健康對照組之間的分布無顯著差異(p＞0.05)。c1、c2等位基因在酒精性肝病組中的頻率分別為55％和45％，較嗜酒無肝病組和健康對照組c2等位基因頻率明顯升高，差異據統(tǒng)計學意義(p＜0.005)。嗜酒無肝病組與健康對照組相比無顯著差異(p＞0.05)。 [結論]通過抽取外周靜脈血提取DNA作為基因模板，用PCR方法擴增